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文檔簡介
1、隨著水體富營養(yǎng)化的日益加劇,有害藻類水華在世界范圍暴發(fā)頻率正在逐年增加。銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)是導(dǎo)致水華發(fā)生的主要藻種,它不但破壞了水域生態(tài)系統(tǒng)的平衡,而且會(huì)產(chǎn)生大量藻毒素和其它代謝產(chǎn)物,對(duì)人類身體健康、水生生物生存和水源供給帶來負(fù)面影響。在防治有害藻類水華方面,己經(jīng)陸續(xù)采用了物理、化學(xué)等方法治理,它們或多或少都存在缺點(diǎn),而選用環(huán)境友好的生物方法,特別是溶藻微生物治理水華已受到學(xué)者的廣泛關(guān)注。
2、 本研究通過將環(huán)境水體微生物群與銅綠微囊藻共培養(yǎng),富集并篩選到具有高效穩(wěn)定溶藻能力的的微生物液。采用一系列理化因素對(duì)溶藻微生物液的溶藻成分進(jìn)行了初步的研究。通過宏測序的方法對(duì)溶藻微生物液的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析。主要研究結(jié)果如下:
1.溶藻微生物的富集
調(diào)查重慶城郊湖泊和水塘的水華爆發(fā)情況,選取10個(gè)藻類爆發(fā)嚴(yán)重的水域進(jìn)行環(huán)境微生物水樣采集。環(huán)境微生物水樣與銅綠微囊藻液共培養(yǎng),進(jìn)行多輪富集篩選最后得到兩組強(qiáng)而穩(wěn)定的
3、溶藻微生物液cq-a和cq-b。相比于對(duì)照組藻液的濃綠色,cq-a和cq-b實(shí)驗(yàn)組的藻液顏色發(fā)生了極大的改變,已變?yōu)辄S色。這顯示cq-a和cq-b實(shí)驗(yàn)組中的銅綠微囊藻已經(jīng)大量死亡。
2.溶藻因素分析
離心處理該溶藻微生物液,3000 rpm離心5 min便可沉淀溶藻物,7000 rpm離心5 min后上清液便失去溶藻能力;膜過濾處理該溶藻微生物液,溶藻物不能通過2μm的濾膜;溫度處理該溶藻微生物液,45℃水浴處理10
4、 min即可使其溶藻活性顯著降低,48℃水浴處理10 min便可使其完全失去溶藻能力;抗生素處理該溶藻微生物液,加入放線菌酮對(duì)其溶藻能力沒有影響,加入氯霉素對(duì)其溶藻能力稍有影響,加入四環(huán)素則喪失溶藻能力,抗生素處理結(jié)果說明溶藻的微生物不是真菌,革蘭氏陽性菌的缺失對(duì)溶藻活性的影響要大于革蘭氏陰性菌;細(xì)菌培養(yǎng)基分離的單菌落都沒有顯示出顯著的溶藻活性。研究表明,溶藻微生物液的溶藻物是由多種細(xì)菌組成的細(xì)菌菌群。
3.溶藻細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分
5、析
16SrRNA基因高通量測序結(jié)果表明,cq-a和cq-b的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)表現(xiàn)出了一定的相似性,這種相似性在含量較多的細(xì)菌類群中顯著。陶厄氏菌屬在cq-a和cq-b中所占比率分別達(dá)到42.33%和45.12%,作為含量最多的細(xì)菌屬,在兩個(gè)樣品中表現(xiàn)出了極大的相似性。紅桿菌屬在cq-a和cq-b中所占比率相近,分別為14.26%和7.38%。Leadbetterella在cq-a和cq-b中所占比率很相近,分別為1.83%和1.
6、51%。由于兩個(gè)溶藻微生物液生長環(huán)境和營養(yǎng)條件的完全一致,導(dǎo)致具有相似的優(yōu)勢菌群,這可能與定向選擇密切相關(guān)。含量豐富的細(xì)菌類群在整個(gè)細(xì)菌群落的代謝及物質(zhì)循環(huán)方面發(fā)揮著基礎(chǔ)性的作用。細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)同樣顯示出了差異性,這種差異性在含量相對(duì)較少的細(xì)菌類群中顯著。部分細(xì)菌屬在兩個(gè)樣品中的差異性較大,Algoriphagus在兩個(gè)樣品中的含量相差56.49倍,玫瑰單胞菌屬在兩個(gè)樣品中的含量相差26.86倍,醋酸桿菌科未分類屬在兩個(gè)樣品中的含量相差1
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