利用細菌介導制備納米銀的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究選取東北林業(yè)大學帽兒山林場土壤樣品為實驗材料,利用硝酸銀濃度梯度法從東北林業(yè)大學林場土壤中分離出一株細菌菌株zxw01,通過形態(tài)特征、生理生化特征和16 SrDNA序列分析對菌株進行鑒定,該菌株為革蘭氏陽性細菌,菌體呈桿狀,不能利用木糖、阿拉伯糖等,與解淀粉酶芽孢桿菌屬是一個族群,同源性達99.8%以上,結合形態(tài)學、生理生化特征以及16 SrDNA分析,將該菌株鑒定為解淀粉酶芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaci

2、ens)。對該菌進行部分生物學特性研究并進行菌株鑒定,zxw01能在硝酸銀濃度為0.3 mmol/L的改良LB培養(yǎng)基上生長,具有一定的耐銀能力,最適生長溫度為35℃左右、最適pH為7左右。
  利用細菌培養(yǎng)液與硝酸銀孕育制備納米銀,并采用紫外全波長掃描(UV-vis)、X射線衍射分析(XRD)、透射電子顯微鏡(TEM)、高分辨透射顯微鏡(HRTEM)以及傅里葉變換紅外分析(FTIR)等表征手段對納米銀進行了表征。研究結果表明,利用

3、細菌培養(yǎng)液與硝酸銀孕育合成了球形和近球形納米銀顆粒,納米銀分散性好,結晶性良好,屬于面心立方結構。制備的納米銀的平均粒徑為15 nm,并且在細胞內(nèi)外都合成了納米銀粒子,細胞內(nèi)的粒徑更小,納米銀可能被蛋白或多肽等生物大分子包裹。熱重分析結果表明,納米銀的產(chǎn)率達到了80.6%。通過抑菌實驗得知,菌株zxw01制備的納米銀粒子對大腸桿菌的最低抑菌濃度為20 mg/L,最低殺菌濃度為60 mg/L,對數(shù)期的大腸桿菌在納米銀濃度為60 mg/L的

4、條件下培養(yǎng),在30 min內(nèi)大腸桿菌活菌量減少較快,在2h時納米銀的殺菌率達到98%以上,大腸桿菌基本被殺死。以菌株zxw01制備的納米銀粒子作催化劑,研究了其在光照下對甲基橙的催化效果,研究表明納米銀粒子在光照下對甲基橙的降解率有了明顯的提升,3h后降解率達到81.5%,在光照下有催化降解甲基橙的活性,而在沒有光照條件下失去對甲基橙的催化活性。
  最后,利用SDS-PAGE電泳對菌株zxw01合成納米銀的機理進行初步研究。結果

5、顯示菌株在加入硝酸銀后產(chǎn)生了兩種新的蛋白質(zhì),其大小分別為60 kDa、33 kDa。SDS-PAGE電泳檢測納米銀粒子表面的蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)大小約為33 kDa的蛋白質(zhì)可以被剝離下來,表明33 kDa的蛋白質(zhì)極有可能就是銀離子誘導產(chǎn)生的與納米銀穩(wěn)定有關的蛋白質(zhì),可以抑制納米銀微粒的團聚,而60 kDa的蛋白可能負責還原納米銀。結合實驗結果我們提出菌株zxw01還原制備納米銀的機理,首先,銀離子與細菌表面的銀離子受體結合,同時將信號傳遞給細菌

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