基于電化學(xué)生物傳感器對(duì)谷胱甘肽及相關(guān)酶活性的研究.pdf_第1頁
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1、電化學(xué)傳感器由于其選擇性好,檢測(cè)耗時(shí)短,無污染等優(yōu)點(diǎn),在發(fā)酵工業(yè),疾病預(yù)防,醫(yī)藥食品加工等相關(guān)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。而納米材料由于具有良好的比表面積和獨(dú)特的導(dǎo)電性能,被應(yīng)用到高度敏感的生物感應(yīng)方法設(shè)計(jì)中,如石墨烯,量子點(diǎn),金納米粒子及介孔二氧化硅納米顆粒等。本論文針對(duì)谷胱甘肽(GSH)研究了一系列成本低、快速檢測(cè)、具有更寬檢測(cè)范圍的新型電化學(xué)生物傳感器,其主要內(nèi)容如下:
  (1)DNA門控開關(guān)功能化介孔二氧化硅納米粒子電化學(xué)檢

2、測(cè)GSH采用介孔二氧化硅粒子和DNA門控系統(tǒng)設(shè)計(jì)一種基于正十二硫醇修飾絲網(wǎng)印刷電極(SPE)的直接快速檢測(cè)GSH的電化學(xué)方法。用于電化學(xué)檢測(cè)的T-Hg2+-T結(jié)構(gòu)的DNA門控系統(tǒng)可特異性與GSH發(fā)生取代反應(yīng),門控系統(tǒng)被打開,釋放出亞甲基藍(lán)分子。然后,由于亞甲基藍(lán)(MB)分子滲透到硫醇層堆積,被固定的十二硫醇不僅能避免蛋白的非特異性吸附也提高電流響應(yīng)信號(hào),其檢測(cè)范圍1.0nmol·L-1~1.0 mmol·L-1,檢測(cè)下限為0.6 nmo

3、l·L-1。該方法檢測(cè)下限較低,不用對(duì)檢測(cè)樣品處理,操作簡(jiǎn)單。
  (2)Hg2+觸發(fā)鏈?zhǔn)诫s交反應(yīng)構(gòu)建電化學(xué)傳感器檢測(cè)谷胱甘肽是基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)信號(hào)放大,我們?cè)O(shè)計(jì)一個(gè)具有高度敏感性、簡(jiǎn)單的GSH電化學(xué)檢測(cè)方法。通過對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)在傳感器表面形成dsDNA聚合物。指示劑可以有效地嵌入到雙鏈DNA聚合物凹槽處,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)GSH的檢測(cè),該方法的對(duì)數(shù)線性響應(yīng)范圍為1~500 nmol·L-1,檢測(cè)下限可達(dá)0.6 nmol·L-

4、1。該法技術(shù)已被證明是一種簡(jiǎn)單且高度敏感的對(duì)不同生物分子具有檢測(cè)作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
  (3)電化學(xué)阻抗法快速檢測(cè)GSH及谷胱甘肽還原酶(GR)是金電極經(jīng)過GSH修飾后,其阻抗值顯著增加,而阻抗的增加與GSH濃度密切相關(guān)。通過檢測(cè)酶反應(yīng)溶液中GSH的變化,我們可以間接地求得GR的活性。該傳感器對(duì)GSH的檢測(cè)范圍為250μmol·L-1-16 mmol·L-1。檢測(cè)酶活性范圍在0.005-0.5 U。此外,通過與比色法檢測(cè)得到的G

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