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文檔簡介
1、Aldol加成反應是有機合成化學中一類重要的反應,它能夠構建新型的C-C鍵。生物催化Aldol加成反應研究是備受關注的課題之一,醛縮酶是常見的一種催化不對稱Aldol加成反應的催化劑,而水解酶催化不對稱Aldol加成的研究較少。論文試圖探索水解酶及其突變株的催化特性及其在不對稱合成化學中的應用,研究結果具有較高科學意義和潛在應用價值。
論文對脂肪酶CAL-B活性中心的位點進行隨機突變,通過易錯PCR表達得到了24種突變株CAL
2、-B突變株,經(jīng)純化和質粒測序等表征分析,確認得到純度比較高的CAL-B突變株;研究將脂肪酶CAL-B突變株催化環(huán)己酮和芳香醛的不對稱Aldol加成反應,發(fā)現(xiàn)CAL-B突變株具有催化不對稱Aldol加成反應活性;實驗考察了不同突變株催化不對稱Aldol加成反應的影響,同時還考察了水含量、溫度、時間等因素對酶催化不對稱Aldol加成反應的變化規(guī)律。研究結果表明,脂肪酶CAL-B活性中心的位點位置不同突變株的催化活性不同,其中B12活性最高;
3、突變株B12在以環(huán)己酮作為溶劑的反應體系中添加水可調控CAL-B突變株催化芳香醛和環(huán)己酮Aldol加成反應的活性,實驗合成了不對稱Aldol加成反應產(chǎn)物,最高產(chǎn)率為99%,ee值最高為99%。
論文研究了蛋白酶/酰胺催化芳香醛和環(huán)己酮Aldol加成反應活性,主要研究酸性蛋白酶/甲酰胺和堿性蛋白酶/甲酰胺兩個體系催化不對稱Aldol加成反應。研究以芳香醛和環(huán)己酮作為研究底物,系統(tǒng)考察了酶源、酰胺種類、溫度、酶量和底物結構等條件對
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