低聚木糖美拉德反應(yīng)及其衍生物活性.pdf_第1頁(yè)
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1、低聚木糖(Xylo-oligosaccharides,XO)是由秸稈、玉米芯等富含木聚糖的原材料經(jīng)過(guò)水解分離精制而得的一類寡聚糖,它結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,由2至7個(gè)木糖分子以β-1,4糖苷鍵首尾連接而成,其主要成分為木二糖、木三糖。低聚木糖既耐強(qiáng)酸又耐高溫,且理化性質(zhì)非常穩(wěn)定,作為一種重要的益生元,具有很強(qiáng)的增殖腸道益生菌的作用,因而被廣泛應(yīng)用于微生態(tài)健康領(lǐng)域。此外,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,它還具有一定的抗氧化和降血脂作用,因而在健康保健領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。然

2、而,作為一種新型食品添加劑,其化學(xué)結(jié)構(gòu)改性以及衍生物抗氧化性方面研究卻甚為少見。
  低聚木糖結(jié)構(gòu)中含有大量羰基,可以與食品中氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)。本文以美拉德反應(yīng)作為改性手段,制得低聚木糖衍生物,考察不同種類氨基酸、反應(yīng)羰基與氨基比例以及金屬離子存在條件下,美拉德反應(yīng)的過(guò)程特征、衍生物分子量、紅外表征以及還原糖含量與糖醛酸含量等結(jié)構(gòu)特點(diǎn),并比較了衍生物抗氧化性能(超氧陰離子、DPPH清除能力和還原能力)的差別,以期為低聚木糖衍生

3、化反應(yīng)和改性應(yīng)用提供思路,并為開發(fā)天然、健康、無(wú)毒的食品抗氧化劑提供參考。
  本文首先通過(guò),低聚木糖與甘氨酸、脯氨酸,以及三種金屬離子存在條件下與甘氨酸的美拉德反應(yīng),檢測(cè)不同氨基酸、羰氨摩爾質(zhì)量比,以及金屬離子存在條件下反應(yīng)過(guò)程中pH值、紫外-可見吸光值以及熒光值的變化,并運(yùn)用紅外分析、分子量測(cè)定、還原糖含量以及糖醛酸含量測(cè)定等方法對(duì)低聚木糖衍生物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,最后檢測(cè)低聚木糖及其衍生物對(duì)超氧陰離子、DPPH自由基清除能力和還原

4、能力,主要研究結(jié)果如下:
  1.美拉德反應(yīng)進(jìn)程研究表明:隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),pH值呈下降趨勢(shì);295 nm和420 nm處的紫外-可見吸收光譜不斷增強(qiáng);熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)分別為370 nm和440 nm)也不斷增大;凝膠滲透色譜(GPC)分子量測(cè)定結(jié)果表明,低聚木糖衍生物的分子量較反應(yīng)前均得到增加;紅外分析顯示,衍生物結(jié)構(gòu)中留有多糖吸收峰,而氨基酸的氨基峰消失;隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng),衍生物中還原糖含量逐漸降低,糖醛酸含量逐

5、漸升高。
  2.低聚木糖與甘氨酸美拉德反應(yīng),反應(yīng)后,衍生物對(duì)超氧陰離子、DPPH自由基的清除能力以及還原能力都有所提升,且反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng),抗氧化性能越佳,即反應(yīng)30小時(shí)后的衍生物抗氧化能力強(qiáng)于15小時(shí),而反應(yīng)5小時(shí)衍生物最弱;相同反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)物中羰氨比不同,抗氧化能力也有差異,當(dāng)羰基與氨基摩爾質(zhì)量比為1:1時(shí),衍生物抗氧化性最強(qiáng),1:2次之,2:1衍生物最弱;隨著反應(yīng)進(jìn)行,衍生物中還原糖含量逐漸降低,而糖醛酸含量不斷增加,說(shuō)明糖

6、醛酸含量影響著衍生物的抗氧化性能。
  3.低聚木糖與脯氨酸美拉德反應(yīng),相同反應(yīng)時(shí)間,當(dāng)?shù)途勰咎桥c脯氨酸的羰氨摩爾質(zhì)量比為1:1時(shí),衍生物抗氧化性能最強(qiáng),其次是1:2,而2:1的衍生物抗氧化性最弱;相同羰氨比,反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng),抗氧化性越強(qiáng),30小時(shí)衍生物的抗氧化性明顯強(qiáng)于15小時(shí)和5小時(shí)衍生物;隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),衍生物中糖醛酸含量逐漸升高,抗氧化性增強(qiáng),說(shuō)明糖醛酸含量影響著衍生物的抗氧化性能。
  4.低聚木糖與甘氨酸和脯氨酸

7、以羰氨摩爾質(zhì)量比為1:1,反應(yīng)5h,通過(guò)檢測(cè)衍生物對(duì)超氧陰離子、DPPH的清除能力以及還原能力,對(duì)其抗氧化性進(jìn)行評(píng)估比較。結(jié)果表明:低聚木糖-甘氨酸抗氧化性優(yōu)于低聚木糖-脯氨酸,說(shuō)明采用不同結(jié)構(gòu)氨基酸,制得衍生物的抗氧化性能有差異,這與氨基酸的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有關(guān),分子量小、氨基空間位阻小的氨基酸更易于與低聚木糖反應(yīng);糖醛酸含量測(cè)試結(jié)果表明,低聚木糖-甘氨酸衍生物的糖醛酸含量高于低聚木糖-脯氨酸衍生物,說(shuō)明相同羰氨比,同一反應(yīng)時(shí)間,衍生物中糖醛

8、酸含量越高,抗氧化性越強(qiáng)。
  5.低聚木糖-甘氨酸美拉德反應(yīng)溶液中添加Fe3+、Cu2+和Mg2+,原子吸收測(cè)試結(jié)果表明衍生物中幾乎不含金屬離子;隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),衍生物中的還原糖含量逐漸降低,糖醛酸含量逐漸升高;Fe3+、Cu2+和Mg2+對(duì)美拉德反應(yīng)進(jìn)程有不同程度的影響,由紫外-可見吸光度和熒光值可知Fe3+和Cu2+可促進(jìn)美拉德反應(yīng),而Mg2+則抑制反應(yīng)進(jìn)行,且濃度為0.020 mol/L的反應(yīng)組比0.005 mol/L的

9、反應(yīng)組對(duì)美拉德反應(yīng)進(jìn)程影響效果更明顯??寡趸Y(jié)果顯示,反應(yīng)溶液中添加Fe3+和Cu2+后,衍生物的抗氧化性優(yōu)于對(duì)照組;金屬離子濃度相同時(shí),F(xiàn)e3+反應(yīng)組抗氧化性優(yōu)于Cu2+反應(yīng)組;而反應(yīng)溶液中添加Mg2+后,抗氧化性降低,Mg2+濃度為0.020 mol/L的影響效果比0.005 mol/L明顯。Fe3+、Cu2+和Mg2+存在條件下衍生物的抗氧化性強(qiáng)弱順序?yàn)椋篨G-Fe3+>XG-Cu2+>XO>XG-Mg2+,這與糖醛酸含量測(cè)試結(jié)果

10、一致,說(shuō)明糖醛酸含量是影響衍生物抗氧化性的重要因素。
  本研究通過(guò)不同條件下低聚木糖美拉德反應(yīng),監(jiān)測(cè)反應(yīng)pH值、紫外-可見吸光值以及熒光值的變化趨勢(shì);檢測(cè)衍生物紅外光譜、分子量、還原糖含及量糖醛酸含量,對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步探究;比較了氨基酸種類、羰基與氨基比例、反應(yīng)時(shí)間、金屬離子存在條件下對(duì)形成的衍生物抗氧化性能的影響。結(jié)果表明隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),反應(yīng)物紫外-可見吸收與熒光吸收強(qiáng)度增強(qiáng),其衍生物中還原糖含量逐漸降低,糖醛酸含量增加,抗

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