1、高效液相色譜是20世紀60年代末期發(fā)展起來的一種新型分離分析技術。自問世以來,因其具有簡便、快速、靈敏、準確的特點而被廣泛應用于食品工業(yè)、化學工業(yè)及生化、醫(yī)學研究等領域中。作為一種重要的分析技術,質譜不僅具有高靈敏度、高選擇性等特點,也可分析未知物的結構,因此高效液相色譜法.質譜聯(lián)用在藥物及其代謝產物研究、天然產物化學成分分析、殘留物分析、生物大分子分析及臨床診斷研究具有廣泛應用。
　　 本文建立了高效液相色譜聯(lián)用技術研究血漿中

2、苯扎貝特、二羥丙茶堿及連翹苷的含量測定的新方法。論文由綜述和研究報告兩個部分組成,第一部分是綜述,在這部分中簡單概述了高效液相色譜的特點、質譜的組成及特點、藥物代謝動力學及其應用、高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術在血漿中藥物分析的應用。第二部分是研究報告,在這部分中建立了利用高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術對血漿中苯扎貝特、連翹苷濃度進行檢測,在大鼠血漿和尿液中二羥丙茶堿濃度,同時研究了連翹苷和二羥丙茶堿在體內藥代動力學。本文主要包括:大鼠血漿中苯

3、扎貝特的HPLC-MS法測定,HPLC法定量分析和測定在大鼠血漿和尿液中二羥丙茶堿濃度及其藥代動力學特征,液質聯(lián)用技術測定大鼠血漿中的連翹苷及其藥代動力學研究。
　　 本論文共分為四章。
　　 第一章緒論
　　 緒論對高效液相色譜、質譜及藥代動力學及其應用進行了簡單概述,并介紹了質譜的結構和特點,高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術在藥物代謝和藥代動力學的應用和發(fā)展。
　　 第二章大鼠血漿中苯扎貝特的HPLC-MS

4、法測定
　　 建立一種簡便、快速、靈敏的高效液相色譜-質譜聯(lián)用(HPLC-MS)測定大鼠血漿中苯扎貝特的方法。采用Gemini C18(150×4.6mm,5μm,Phenomenex,CA,USA)色譜柱;流動相:乙腈/甲醇/水(0.03%甲酸水溶液,60:15:25,v/v/v);柱溫:35℃,流速為0.3 mL/min:紫外吸收波長(UV)為235nm;進樣量5μL。質譜采用電噴霧電離(ESI)負離子模式,用于定量分析的離

5、子分別為[M-H]-m/z359.65→273.70(苯扎貝特)和[M-H]-m/z212.95→127.08(氯貝酸)。對苯扎貝特檢測的線性范圍為0.073μg/mL-7.884μg/mL,r=0.9995。得到苯扎貝特的平均回收率為94.3%-103.1%;方法的日內和日間的相對標準偏差(RSD)均小于6%;最低檢測限(LOD)與定量限(LOQ)分別為9.0 ng/mL和30ng/mL;該方法重現(xiàn)性好,靈敏度高,為臨床上檢測人體血漿

6、中苯扎貝特的濃度提供了一種可靠的分析手段。
　　 第三章液質聯(lián)用技術測定大鼠血漿的連翹苷及其藥代動力學應用
　　 建立了一種簡便、靈敏、有效的高效液相色譜-質譜聯(lián)用測定大鼠漿中的連翹苷檢測的新方法,并研究了該藥物在大鼠體內的藥代動力學特征。采用乙腈沉淀蛋白質處理血漿樣品,處理后的樣品經Gemini-C18 column(150×4.6mm,5 m,Phenomenex,CA,USA)分離,流動相為A(0.05%乙酸水溶液

7、):B(乙腈)體積比為44:56(v/v),流速為0.3mL/min,進樣量:5μL,柱溫:30℃,連翹苷和內標利血平在ESI正離子模式質譜條件下,主要生成[M+Na+]m/z554.85(連翹苷)和[M+H+]m/z609.29(利血平)準分子離子峰。血漿中連翹苷的線性范圍為0.069～8.97μg/mL;檢測限(S/N=3,進樣量為5μL)為7.04 ng/mL;血漿中三種濃度大小連翹苷的平均回收率為97.7%,96.3%和100.

8、1%:日內、日間RSD均小于7.O%.實驗結果表明本方法簡便可行,重現(xiàn)性好,靈敏度高,精密度高,可以用于連翹苷血藥濃度測定和藥動學研究。
　　 第四章HPLC法定量分析和測定在大鼠血漿和尿液中二羥丙茶堿濃度及其藥代動力學特征
　　 建立了一種簡便、快速、靈敏的高效液相色譜法測定大鼠的血漿和尿液中二羥丙茶堿濃度方法,并對其藥代動力學進行研究。采用Luna NH2(25×4.6 mm,5μm,Phenomenex,CA,US

9、A)色譜柱,流動相:乙腈:水(0.01%乙酸水溶液,80:20,v/v),柱溫:35℃,流速為0.3mL/min,紫外吸收波長(UV)為273 nm,進樣量20μL。對二羥丙茶堿在尿液和血漿里檢測的線性范圍為0.088μg/mL-46.62μg/mL,在尿液中得到的二羥丙茶堿的平均回收率為99.14%-101.15%,在血漿中得到的二羥丙茶堿的平均回收率為98.61%-99.18%,方法的日內和日間的相對標準偏差(RSD)均小于1.96