色米酚類(lèi)物質(zhì)調(diào)節(jié)脂質(zhì)生成與積累的機(jī)理研究.pdf_第1頁(yè)
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1、色米即有顏色的糙米,是特種水稻的一種。色米以其獨(dú)具特色的口味、五彩繽紛的顏色以及豐富的營(yíng)養(yǎng)日益受到人們的青睞。營(yíng)養(yǎng)成分中富含多種對(duì)人體有益的維生素及微量元素。另外,色米中含有的酚類(lèi)物質(zhì)賦予了色米較強(qiáng)的抗氧化性。同時(shí),有關(guān)色米減肥的研究也有相關(guān)報(bào)道,但其抑制脂肪生成和積累的機(jī)理還沒(méi)有得出定論。
  該課題的目的是研究七種不同品種的色米提取物中酚類(lèi)物質(zhì)的抗氧化性物質(zhì)基礎(chǔ)以及抑制脂質(zhì)生成與積累的作用機(jī)理。以間充質(zhì)干細(xì)胞為模型進(jìn)行成脂分化

2、,闡述其潛在的調(diào)節(jié)脂質(zhì)生成和積累的機(jī)理,利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Realtime-PCR)研究脂肪細(xì)胞與脂代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響,用來(lái)確定色米是否具有治療或預(yù)防肥胖的功效。
  本實(shí)驗(yàn)主要包括三大部分。第一部分對(duì)原料色米進(jìn)行提取,測(cè)定提取物中總酚含量和黃酮含量以及其抗氧化活性,采用多種自由基體系如DPPH·自由基、ABTS+自由基及超氧自由基O2-·的清除能力。結(jié)果表明總酚含量和黃酮含量越高的品種,具有越強(qiáng)的抗氧化能力,具

3、體表現(xiàn)在其清除自由基的能力。色米中總黃酮對(duì)總酚有一定的貢獻(xiàn),二者均對(duì)其抗氧化活性有很大的貢獻(xiàn),三種自由基間也存在較高的相關(guān)性。
  第二部分利用紫外分光光度法對(duì)提取物酚類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描以及高效液相色譜法進(jìn)行成分分析。結(jié)果顯示酚類(lèi)物質(zhì)是其抗氧化的物質(zhì)基礎(chǔ),主要有沒(méi)食子酸、兒茶素、阿魏酸,香草酸以及咖啡酸等。
  第三部分利用C3H10T1/2-Clone8間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行體外研究,以確定色米提取物抑制脂肪形成過(guò)程的作用,對(duì)

4、誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞形成的內(nèi)脂滴進(jìn)行油紅O染色和量化法,Realtime-PCR測(cè)定與脂代謝相關(guān)基因(PPARγ,C/EBPα,F(xiàn)abp4,AdipoQ,Plin1)mRNA的表達(dá)量,分析脂肪的分化程度。結(jié)果表明:添加色米提取物處理后的實(shí)驗(yàn)組,其細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因表達(dá)與陽(yáng)性對(duì)照組相比均出現(xiàn)不同程度的下調(diào),樣品處理組各基因表達(dá)水平與酚類(lèi)含量趨勢(shì)一致;利用蛋白質(zhì)印記法(Western Blot)對(duì)成脂分化所必需的過(guò)氧化物酶體增殖劑激活受體PPA

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