1、本論文由綜述和研究報(bào)告兩部分組成。第一部分為綜述部分，第二部分為研究報(bào)告部分。其中，研究報(bào)告由三個(gè)實(shí)驗(yàn)體系組成。綜述部分簡(jiǎn)要簡(jiǎn)介了電致化學(xué)發(fā)光(ECL)反應(yīng)的基本原理和基本條件，重點(diǎn)介紹了ECL分析法主要的體系;最后簡(jiǎn)要概括了蛋白質(zhì)激酶的現(xiàn)實(shí)意義以及現(xiàn)存的各種檢測(cè)方法。
　　 研究報(bào)告主要包括以下幾方面的工作內(nèi)容:
　　 1.首次基于一種簡(jiǎn)單和綠色的一步自聚合法將聚去甲腎上腺素(PNE)修飾到石英毛細(xì)管內(nèi)壁，用于分離氨基

2、酸對(duì)映異構(gòu)體，且將毛細(xì)管電色譜與電致化學(xué)發(fā)光法聯(lián)用(CEC-ECL)。并通過(guò)掃描電鏡、紫外-可見(jiàn)分光光譜和接觸角表征了PNE粘附層的形成。與裸的毛細(xì)管相比，修飾后的毛細(xì)管具有更好的親水性、對(duì)氨基酸具有更小的非特異性吸附，且使得組氨酸、苯丙氨酸和纈氨酸對(duì)映體分離度分別為1.6，1.8和1.6。
　　 2.基于酶功能化的金納米探針的信號(hào)放大和親和素與生物素體系的信號(hào)轉(zhuǎn)換，構(gòu)建了一個(gè)新穎的ECL生物傳感器檢測(cè)激酶活性及其抑制劑。納米探

3、針的制備是將biotin-DNA和葡萄糖氧化酶(GOx)共軛修飾到Au NPs上。同時(shí)，通過(guò)特異性的抗原-抗體作用將生物素化的抗磷酸化絲氨酸抗體綁定到磷酸化位點(diǎn)。在生物素和親和素的作用下，納米探針能結(jié)合到電極表面的磷酸化位點(diǎn)上，當(dāng)ECL反應(yīng)發(fā)生在魯米諾ECL生物傳感器中時(shí)，組裝到納米探針上的GOx能催化氧化葡萄糖產(chǎn)生H2O2，促進(jìn)魯米諾的ECL。所提出的ECL生物傳感器提供了一個(gè)高靈敏，低的檢測(cè)限，寬的線性范圍和良好的穩(wěn)定性的方法用來(lái)檢

4、測(cè)蛋白質(zhì)激酶A(PKA)活性。而且，這個(gè)生物傳感器也被用于定量分析激酶抑制劑。
　　 3.首次我們?cè)贓CL生物傳感器中研究了一種新穎且通用的ECL-RET方法，通過(guò)氧化石墨烯(GO)和石墨烯量子點(diǎn)(GQDs)之間的能量轉(zhuǎn)移作用證明了這種方法在靈敏的檢測(cè)蛋白質(zhì)激酶及其抑制劑的可行性。通過(guò)特異的抗原-抗體作用將單克隆抗體共軛的GO綁定到電極上的磷酸化絲氨酸位點(diǎn)，這樣就將GO和GQDs之間的距離拉近，利于GQDs的發(fā)光猝滅。提出的EC