兩例亞細(xì)胞器定位性近紅外熒光探針.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、熒光生物成像技術(shù)是在亞細(xì)胞層次展現(xiàn)生物組織形貌的一個很有力的方法,在熒光成像中,最基本也是最關(guān)鍵的是熒光探針。基于熒光探針的熒光分析法由于其高靈敏性、高選擇性、易于操作、實時檢測、無損檢測以及對生物樣品具有良好的相容性的特點已廣泛應(yīng)用于對各種物種的檢測中。近年來,熒光成像技術(shù)迅猛發(fā)展,其已經(jīng)成為對活細(xì)胞和動物體內(nèi)各種微小物種進(jìn)行檢測和成像不可或缺的工具。
  肼是一種大家熟知的高能推進(jìn)劑,其廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)的各個領(lǐng)域,但肼具有致命

2、的毒性。由此,開發(fā)可靠、靈敏的分析手段用于肼的精確檢測是非常重要的。我們基于七甲川菁染料甲川鏈上π共軛體系的調(diào)節(jié),合成了一例定位于線粒體且能在近紅外光區(qū)選擇性比率檢測肼的熒光探針Cy7A。Cy7A對肼有比較好的響應(yīng),在肼的作用下,Cy7A能被選擇性地肼解,其吸收和發(fā)射光譜均會發(fā)生很大的變化(最大吸收波長從784 nm藍(lán)移到520 nm,最大發(fā)射波長從810 nm藍(lán)移到582 nm)。其他離子和小分子對肼的檢測不會有明顯干擾,Cy7A對肼

3、的檢測限達(dá)到0.81 ppb。Cy7A具有可忽略的細(xì)胞毒性,且定位于細(xì)胞中的線粒體,這對肼在細(xì)胞層次的毒理學(xué)研究具有一定的促進(jìn)意義。Cy7A能用于對實際水樣中肼定量檢測,還能對細(xì)胞中的肼進(jìn)行比率成像,而且首次通過兩個通道的熒光信號變化監(jiān)測了小鼠體內(nèi)的肼。
  溶酶體及與溶酶體相關(guān)的細(xì)胞器由真核細(xì)胞中呈酸性的囊狀結(jié)構(gòu)組成,其內(nèi)部的pH為4.0-5.0,它們其中包含了大量的具有各種功能的酶和分泌蛋白。利用雙光子激發(fā)的雙光子熒光成像技術(shù)

4、能真實地展現(xiàn)溶酶體在活細(xì)胞和組織中的分布,是生命科學(xué)研究中的一個十分重要的工具。我們合成了一例近紅外雙光子染料PBC,PBC具有明顯的溶劑化效應(yīng)和較好的光穩(wěn)定性,PBC的最大發(fā)射波長能達(dá)到近紅外并且具有很大的Stokes shift(大于170 nm)。PBC對對活細(xì)胞(不管是癌細(xì)胞還是正常細(xì)胞)均有比較好的染色效果。將PBC分別與商業(yè)化的溶酶體定位染料Lyso Tracker Green和商業(yè)化的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位染料ER Tracker G

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