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![280nmLED-紫外線應(yīng)用于皮瓣缺血再灌注損傷后治療的實驗研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/6/23/6d9060ef-76a6-424b-bf62-35145934147f/6d9060ef-76a6-424b-bf62-35145934147f1.gif)
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文檔簡介
1、目的:
通過應(yīng)用280nmLED(Light Emitting Diode,LED發(fā)光二極管)紫外線在大鼠腹部皮瓣產(chǎn)生缺血再灌注損傷后對大鼠腹部術(shù)區(qū)進行局部照射,來觀察280nmLED紫外線對大鼠皮瓣再灌注損傷后組織的治療效果,并就相應(yīng)的實驗組和對照組所產(chǎn)生的結(jié)果來探討其相關(guān)及可能的作用機制。
方法:
將同一批在相同環(huán)境下長成的 Wistar健康雄性鼠共40只,隨機分4組,280nm、320nm的實驗組各1
2、組,空白組1組,10只一組,剩下的10只則可作為同批次相同環(huán)境下成長的替補組大鼠,防止實驗中的大鼠因意外造成皮瓣損傷影響到實驗結(jié)果或死去造成實驗結(jié)果缺失的,為保證實驗的正常進行,選擇替補大鼠按照相應(yīng)的實驗方法繼續(xù)完成實驗。手術(shù)及替補組大鼠在實驗正式開始前均養(yǎng)于SPF動物實驗室1w,并于術(shù)前1d禁食;10%水合氯醛腹腔麻醉行腹部皮瓣模型制作手術(shù),在所有實驗及空白組大鼠腹部皮膚建立再灌注損傷皮瓣的模型后,對于280nm和320nm兩個實驗組
3、大鼠模型建成后即立刻行對應(yīng)的人工紫外線術(shù)區(qū)皮瓣照射1次,時間為持續(xù)4 min,后持續(xù)單籠飼養(yǎng),正常飼養(yǎng)進食,直至取標本處死;從術(shù)后第1天開始每天按時按量對兩個實驗組的腹部皮瓣進行相應(yīng)波長的紫外線照射,2次/1d,每次4 min,共8min,持續(xù)7 d;對于空白組大鼠其皮瓣模型制備成功后,不予任何處理措施,等空白組鼠完全從麻醉中醒后給予單籠正常飼養(yǎng)進食;術(shù)后每天進行觀察,若出現(xiàn)大鼠啃食皮瓣致皮瓣毀損影響結(jié)果的,及時按相同實驗方法進行相應(yīng)組
4、的實驗進行替補大鼠實驗;三組實驗鼠都在術(shù)后7d時候通過坐標貼紙的方法來測算腹部手術(shù)區(qū)域皮瓣的成活面積同時計算相應(yīng)皮瓣的成活率;手術(shù)后7d給予各組大鼠處死,并在各組大鼠的腹部相應(yīng)術(shù)區(qū)相應(yīng)的位置,切取皮瓣組織并立即相應(yīng)處理制作成病理切片再行免疫組織化學染色,后通過顯微鏡及 Image-Pro Plus6.0測算陽性血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的表達面積以及所占百分比,使用
5、 TUNEL實驗方法檢測組織標本中細胞中的凋亡比率,通過 SPSS軟件對數(shù)據(jù)進行處理,獲取結(jié)果。
結(jié)果:
280nm,320nm和空白三組術(shù)后7 d皮瓣的成活率檢測分別為62.38%±8.64%、54.49%±4.48%和39.61%±4.22%,對應(yīng)的組織中 VEGF陽性表數(shù)據(jù)分別為91.39%±9.29%、70.46%±4.02%和34.97%±3.08%,對應(yīng)分組皮瓣組織中細胞凋亡率顯示為53.06%±5.64
6、%、64.72%±3.73%和32.82%±1.72%。所有的實驗的對應(yīng)數(shù)據(jù)指標中,280nm、320nm和對照組相比,P<0.05;280nm和320nm兩實驗組比較,P<0.05。
結(jié)論:
280nmLED-紫外線局部照射治療大鼠腹部皮瓣缺血再灌注后損傷效果明顯,作用機制與皮瓣中 VEGF表達量的提高促進毛細血管新生而對組織的成活有積極作用;經(jīng)紫外線照射的皮瓣組織細胞凋亡率升高,且紫外線波長較短照射組細胞凋亡情況
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