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![納米電極的制備及其在快速檢測水體中大腸桿菌的電分析化學(xué)研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/2/099eda74-682c-46d0-a66b-d5729fe8627f/099eda74-682c-46d0-a66b-d5729fe8627f1.gif)
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文檔簡介
1、本文利用納米技術(shù)先后制備了一系列納米修飾電極,包括納米二氧化錫電極、酶修飾納米氧化銦電極、納米鉍修飾玻碳電極,應(yīng)用這些電極實(shí)現(xiàn)對水體中大腸桿菌的快速檢測,檢測時間都在幾個小時以內(nèi),最低檢測限可以達(dá)到100cfu/mL。另外,采用電分析化學(xué)、光度分析方法研究了銅、不銹鋼材料對細(xì)菌的抗菌生物效應(yīng),希望能夠?qū)ふ乙环N廣譜抗菌的方法。因此,做了以下幾個方面的研究: 1.納米二氧化錫電極的制備及其用于水體中大腸桿菌的快速計數(shù)研究。
2、制備了新型納米二氧化錫電極,用該電極作為工作電極,采用計時電流法對水體中大腸桿菌進(jìn)行了快速計數(shù)研究。由于水在納米二氧化錫電極表面電解產(chǎn)生的·OH能夠引起大腸桿菌細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化,從而在電極上產(chǎn)生氧化電流,根據(jù)氧化電流變化與大腸桿菌數(shù)量的關(guān)系,對大腸桿菌進(jìn)行快速計數(shù),檢測下限可達(dá)1×103cells·mL-1。通過大腸桿菌脂質(zhì)過氧化后丙二醛含量的檢測,本文也對大腸桿菌在納米二氧化錫電極上的電化學(xué)響應(yīng)機(jī)理進(jìn)行了初步的探討。 2.基于
3、分子自組裝的雙酶傳感器快速計數(shù)大腸桿菌的研究。 采用3-氨基丙基三乙氧基硅烷[(3-aminopropyl)triethoxysilane,APTES]分子在銦錫氧化物電極(ITO電極)上的自組裝,通過戊二醛形成席夫堿,將多元酚氧化酶(1accase)和辣根過氧化酶(horseradishperoxidase,HRP)化學(xué)鍵合在ITO電極上,制成雙酶傳感器。該傳感器檢測多元酚時具有較高的靈敏度和較低的檢測限。由于大腸桿菌在含水楊
4、酸的培養(yǎng)液中代謝時能夠產(chǎn)生多元酚(主要為2,5-二羥基苯甲酸,2,5-dihydroxybenzoicacid(2,5-DHBA)),且產(chǎn)生的多元酚量與大腸桿菌數(shù)量成正比。因此,我們以雙酶傳感器為工作電極,采用計時電流法實(shí)現(xiàn)了對大腸桿菌的快速計數(shù),所花時間僅需要3h。該方法檢測大腸桿菌的線性范圍為1.6×103~1.0×107cells/mL,檢測限為9.7×102cells/mL。 3.基于Bi納米薄層修飾玻碳電極流動注射安培
5、分析快速檢測水體中大腸桿菌的研究。 將Bi納米薄層修飾電極用于流動注射分析中來快速檢測大腸桿菌。在脫氧膽酸鈉(DOC)培養(yǎng)基中,大腸桿菌被甲基葡萄糖醛酸鈉(Methyl-β-D-glucuronidesodium,MetGlu)誘導(dǎo),在細(xì)菌體內(nèi)產(chǎn)生特異性葡萄糖醛酸酶(β-D-glucuronidase)。通過膜滲透劑PolymyxinBnonapeptidehydrochloride(PBN)和溶菌酶Lysozyme對大腸桿菌細(xì)
6、胞膜的作用,葡萄糖醛酸酶從大腸桿菌細(xì)胞中釋放出來。當(dāng)在培養(yǎng)液中加入底物p-Nitrophenylβ-D-glucuronide(PNPG)時,葡萄糖醛酸酶能夠催化分解PNPG而產(chǎn)生4-硝基酚,而4-硝基酚的量與溶液中大腸桿菌的數(shù)量成正比關(guān)系。為了提高檢測4-硝基酚的靈敏度,利用電沉積的方法制備了Bi納米薄層修飾電極,此電極具有高的氫過電位,好的電催化活性,能夠較靈敏地檢測4-硝基酚。由于4-硝基酚在電極上的響應(yīng)電流與大腸桿菌濃度成正比,
7、因此,我們將Bi納米薄層修飾電極用于流動注射安培分析系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了對大腸桿菌的快速檢測。本文研究方法檢測大腸桿菌濃度范圍從1.5×102到1.0×106cfu/mL,其檢測限為100cfu/mL,總的分析時間為3h。 4.銅和不銹鋼材料抗菌生物效應(yīng)的研究 采用電分析化學(xué)方法、光度分析方法研究了銅和不銹鋼材料抗菌的生物效應(yīng)。以大腸桿菌和發(fā)光細(xì)菌為例,不銹鋼材料對它們幾乎沒有抗菌生物效應(yīng),但是銅材料對它們只需作用0.5h,細(xì)菌
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