1、BPOZ(Bood POZ containing gene)又名EFlABP(elongation factor 1A bindingprotein),基因位于染色體的3q21.3,其序列在不同種屬間相當保守.BPOZ蛋白由ANK(ankyrin repeat,錨蛋白重復)和BTB(Broad-Complex,Tramtrack andBric a brac)結構域組成.ANK和BTB結構域介導蛋白相互作用,含這兩個結構域的蛋白常與發(fā)育

2、及腫瘤發(fā)生密切相關,提示BPOZ可能有重要的生物學功能.BPOZ在卵巢癌組織中的表達降低,抑癌基因PTEN可誘導BPOZ表達升高.BPOZ能抑制腫瘤細胞生長,轉染并穩(wěn)定表達BPOZ的結腸癌細胞生長變慢,細胞周期的S期延長并有明顯的G1/S轉變延緩.因此BPOZ可能是一個參與PTEN信號傳導通路的細胞生長或腫瘤抑制基因.基因剔除(gene knockout)是在小鼠整體水平研究基因在生物體內(in vivo)功能的一種直接有效的方法.我們

3、擬通過基因剔除技術建立BPOZ基因缺失小鼠,通過對BPOZ基因剔除小鼠的表型分析來研究BPOZ基因缺失對小鼠生長發(fā)育和生理功能等方面的影響,以及BPOZ與腫瘤發(fā)生的關系.為探討B(tài)POZ基因剔除對細胞生長的影響,我們采用細胞生長曲線、<'3>H胸苷摻入、裸鼠荷瘤、細胞周期分析等一系列實驗來評價BPOZ-/-ES細胞的增殖能力.實驗結果均證明BPOZ-/-ES細胞的生長變慢,細胞周期分析發(fā)現有G1/S期阻滯.進一步的實驗發(fā)現BPOZ-/-M

4、EF細胞也明顯生長減慢.BPOZ-/-細胞生長變慢的結果說明BPOZ可能是細胞正常生長過程中的必要組分.BPOZ可能在調節(jié)細胞生長上起雙重作用:即一定水平的BPOZ維持細胞的正常生長,但在高表達時抑制細胞的生長.為闡明BPOZ是否介導特異靶蛋白的降解及其作用機理,我們研究了BPOZ和EF1A(elongation factor 1A)相互結合的結構域以及BPOZ不同結構域和介導EF1A降解的關系.首先我們用蛋白體外結合實驗證實BPOZ能