1、自由基是人體生命活動(dòng)中多種生化反應(yīng)的中間代謝產(chǎn)物，其中超氧自由基（O2·-）和過(guò)氧亞硝酸根離子（ONOO-）是具有代表性的兩種自由基，它們?cè)诟鞣N致病過(guò)程中都是重要的介導(dǎo)因素，與癌癥、機(jī)體炎癥、組織過(guò)氧化、蛋白質(zhì)交聯(lián)變性、DNA損傷和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等都有著直接的關(guān)系。
　　 02·-不僅自身具有毒性，而且可以經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)生成其它活性氧自由基，進(jìn)一步對(duì)生物體產(chǎn)生損傷作用，且停留時(shí)間較長(zhǎng)。超氧自由基是生物活性最高的氧中心自由基之一，它

2、在生命過(guò)程和化學(xué)反應(yīng)中作為電子受體，形成不同的活性氧自由基鏈中的第一個(gè)自由基，經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)生成其它的氧自由基。和其它的活性氧相比，超氧自由基不是很活潑，但其壽命很長(zhǎng)，因此，超氧自由基危害較大，捕獲超氧自由基進(jìn)行研究具有重要的意義。
　　 ONOO-是NO·與O2·相互反應(yīng)的產(chǎn)物。ONOO-能導(dǎo)致DNA損傷、酶抑制、細(xì)胞死亡和細(xì)菌中毒并且能夠引起一系列疾病。通過(guò)對(duì)自由基的檢測(cè)研究，可以幫助我們更好的解釋疾病產(chǎn)生的原因，采取有效的

3、預(yù)防措施，減少機(jī)體的傷害程度。
　　 目前測(cè)定O2·-與ONOO-的方法主要有電子自旋共振法（ESR）或電子順磁共振法（EPR）、高效液相色譜法（HPLC）、化學(xué)發(fā)光法（CL）、熒光法以及電化學(xué)方法等。然而，由于生物體內(nèi)活性氧自由基的半衰期非常短，穩(wěn)態(tài)濃度極低，所以真正適用于檢測(cè)生物活體內(nèi)O2·-與ONOO-的方法還是比較少的。這就迫切需要科研工作者開(kāi)發(fā)對(duì)O2·-與ONOO-能夠?qū)Ｒ蛔R(shí)別、快速響應(yīng)的熒光探針用以動(dòng)態(tài)觀測(cè)研究某些器

4、官中活性氧自由基的產(chǎn)生、代謝、相互轉(zhuǎn)化及其動(dòng)態(tài)損傷生物機(jī)體的過(guò)程。
　　 本論文利用熒光分析技術(shù)測(cè)定活性氧自由基的方法，此技術(shù)具有靈敏度高、選擇性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。本文合成了三種新型熒光探針，利用探針對(duì)（O2·-）和（ONOO-）進(jìn)行了檢測(cè)，提出了新的檢測(cè)方法。具體研究?jī)?nèi)容分為以下三個(gè)方面：
　　 （1）設(shè)計(jì)合成了一種新型的熒光探針香草醛縮苯胺，建立檢測(cè)O2·-和SOD活性的熒光方法，研究測(cè)定方法的最佳條件，并用于測(cè)定

5、大蒜、洋蔥的SOD活性的測(cè)定，并與鄰苯三酚自氧化法測(cè)定出的SOD活性進(jìn)行了比較。
　　 （2）設(shè)計(jì)合成新型的熒光探針熒光素酰肼，用熒光光譜法檢測(cè)ONOO-，研究測(cè)定方法的最佳條件，探討了其它物質(zhì)對(duì)體系的干擾影響及熒光探針的檢測(cè)單一性，研究測(cè)定方法的靈敏度，精密度。
　　 （3）設(shè)計(jì)合成新型的熒光探針羅丹明6G酰肼，用熒光光譜法檢測(cè)ONOO-，研究測(cè)定方法的最佳條件，探討了其它物質(zhì)對(duì)體系的干擾影響及熒光探針的檢測(cè)單一性，研