1、毛細管電色譜法(Capillary Electro Chromatography, CEC)是一種新型微分離分析技術(shù)。它結(jié)合了毛細管電泳(Capillary Electrophoresis, CE)與液相色譜(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)的雙重優(yōu)點,通過在填充有液相色譜填料的毛細管色譜柱兩端施加高壓直流電場,用電滲流來取代液相色譜中的壓力泵來驅(qū)動流動相,使樣品在毛細管色譜柱中

2、的保留機理同時受到電泳淌度及其在流動相與固定相之間分配系數(shù)的影響,從而大大提高了對樣品的分離能力。另外,相對于液相色譜中壓力流速的拋物線型輪廓,電滲流驅(qū)動下的流動相的流速在通道中呈柱塞狀流型,因而在毛細管中沒有流速的梯度,范式方程中的渦流擴散項極小,即譜帶展寬效應(yīng)極低,這是CEC比HPLC柱效高的根本原因。CEC以其對樣品的高分辨能力,代表了分析學(xué)界高效微分離的趨勢。然而,由于柱內(nèi)易于產(chǎn)生氣泡和重復(fù)性差等問題,純粹的電色譜的發(fā)展受到了嚴(yán)

3、重的限制。加壓毛細管電色譜法(pressurized capillary electrochromatography, pCEC)是在高壓電場的基礎(chǔ)上,附加一定的壓力來共同驅(qū)動流動相,這樣既可避免分離過程中氣泡的產(chǎn)生,提高穩(wěn)定性,又可用壓力來控制流速,縮短分析時間,同時又可實現(xiàn)定量進樣和梯度洗脫。整體柱(monolithic column)是一種用有機或無機聚合方法在色譜柱內(nèi)進行原位聚合的連續(xù)床固定相,具有制備簡單、柱壓低以及能實現(xiàn)快速

4、分離等優(yōu)點,是近年來發(fā)展起來的新型分離介質(zhì),被譽為第四代分離介質(zhì),可以很理想地用于pCEC的分離。本研究發(fā)展了聚合物基質(zhì)的整體柱,采用新的制備單體,制備了能夠分離堿性小分子化合物三聚氰胺的親水毛細管整體柱,嘗試了整體柱新的應(yīng)用領(lǐng)域。本論文具體內(nèi)容包括以下幾個方面:
　　1.文獻綜述:文章簡要介紹了毛細管電色譜的基本理論,對有機聚合物整體柱、硅膠整體柱和親水整體柱的理論研究和和實踐進展進行了綜述,為本實驗提供了理論依據(jù)和方法借鑒。<

5、br>　　2.合成了聚甲基丙烯酸酯基質(zhì)的毛細管整體柱:采用甲基丙烯酸丁酯(BMA)和2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(AMPS)為單體,乙二醇甲基丙烯酸酯(EDMA)為交聯(lián)劑,正丙醇和1,4-丁二醇為致孔劑制備了具有反相作用機理的整體柱,并對其進行了結(jié)構(gòu)表征。通過調(diào)節(jié)不同的色譜條件(pH、緩沖液濃度、電壓、有機相濃度等)研究了其分離機理,證明該類型整體柱的確具有反相色譜作用機理,適合分離非極性化合物。模式下通過分離芳香烴化合物,對毛細管電

6、色譜(CEC)、毛細管微徑液相色譜(μHPLC)以及加壓毛細管電色譜(pCEC)三種分離模式進行了對比研究。
　　3.合成了新型的具有親水作用的毛細管整體柱:以甲基丙烯酸丁酯和3-[N,N-二甲基-[2-(2-甲基丙-2-烯酰氧基)乙基丁銨]丙烷-1-磺酸內(nèi)鹽為單體,制備了新型的具有親水相互作用的毛細管整體柱,通過三聚氰胺在此柱子上的保留行為證明其的確具有親水性。用加壓毛細管電色譜技術(shù)為平臺,優(yōu)化了用此整體柱分析奶制品中三聚氰胺的

7、色譜條件,當(dāng)流動相中乙腈與10 mM磷酸鹽緩沖液的體積比為80:20,pH為3,電壓為3 kV,檢測波長215 nm時三聚氰胺能獲得很好的分離。方法學(xué)考察表明,合成的親水相互作用整體柱具有良好的重現(xiàn)性、滲透性,建立的pCEC分析方法檢測限為0.05μg/mL,方法的回收率較高,流動相中無需添加離子對試劑,簡單方便。
　　4.奶制品中三聚氰胺的定量分析:使用本研究合成的新型兼具有親水相互作用和反相作用機理的毛細管整體柱,通過三聚氰胺