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![高通量微流控液滴的生成與優(yōu)化研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/7/23/9ec26b23-a0a4-4246-ad01-f1e814369c93/9ec26b23-a0a4-4246-ad01-f1e814369c931.gif)
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文檔簡介
1、微流控液滴是近年來在微流控芯片上發(fā)展起來的一種全新的操縱微小體積液體的技術(shù)。作為納升甚至皮升體積的微反應(yīng)器,液滴已經(jīng)應(yīng)用于快速酶反應(yīng)動力學(xué)研究、細(xì)胞分析、DNA分析、蛋白結(jié)晶等領(lǐng)域。液滴微流控平臺能夠快速穩(wěn)定的產(chǎn)生尺寸可控、大小均勻的液滴,與傳統(tǒng)的微孔板法篩選工業(yè)酶相比,液滴微流控技術(shù)的篩選通量可以提高1000倍,因此,液滴微流控技術(shù)有巨大的潛力成為下一代的超高通量篩選平臺。針對目前我國對微流控液滴技術(shù)的相關(guān)研究還較少,本研究以液滴為基
2、礎(chǔ),對影響微液滴自身的相關(guān)特性-液滴尺寸、生成通量、油包水液滴外層連續(xù)相選擇、液滴的穩(wěn)定性、擴散性等參數(shù)進(jìn)行了研究,并對液滴微流控技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)行了初步的探索。
本研究采用模塑法制作了基于PDMS材料的多功能液滴微流控芯片,利用這些芯片,以添加3%(V/V)非離子型表面活性劑Abil EM90的礦物油為連續(xù)相,雙酶偶聯(lián)熒光反應(yīng)試劑為分散相,生成了油包水型的微液滴,液滴尺寸可控制在20~50μm之間,與單個細(xì)胞直徑(1~20μm)
3、大小相近,液滴生成速度約3.6×104~1.8×105個/h。顯微鏡下觀察液滴尺寸均一性和單分散性良好。
實驗以生成的液滴為微反應(yīng)器,對重要氨基酸(谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)進(jìn)行了液滴包埋,并對包埋氨基酸液滴的穩(wěn)定性、擴散性和生物活性兼容性等進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明,生產(chǎn)的液滴具有良好的生物活性兼容性,室溫靜置培養(yǎng)20 h后,液滴仍能保持95%以上的穩(wěn)定,未發(fā)生形變,液滴間分子交換<2%。利用自行搭建的液滴微流控系統(tǒng)平
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