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![白氏文昌魚COMMD4基因克隆及免疫功能的分析.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/12/9f899053-9475-44d0-9841-38b998919ae8/9f899053-9475-44d0-9841-38b998919ae81.gif)
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文檔簡介
1、COMMD蛋白是最近發(fā)現(xiàn)的一類蛋白家族,因其羧基末端具有高度保守的由70-85個(gè)氨基酸構(gòu)成的獨(dú)特的結(jié)構(gòu)域——COMM結(jié)構(gòu)域(copper metabolismgene MURR1 domain)而命名。目前,COMMD蛋白家族有十個(gè)成員,即COMMD1-COMMD10,這十個(gè)成員皆存在COMM結(jié)構(gòu)域,有研究表明,此結(jié)構(gòu)域可以結(jié)合其他因子如Cu12等,并且似乎在抑制NF-κB方面起關(guān)鍵作用。目前,除了COMMD1外,其他COMMD蛋白的特
2、征及其功能了解的都較少。文昌魚屬于脊索動物門頭索動物亞門,是介于無脊椎動物和脊椎動物的過渡物種,一直被認(rèn)為是研究脊椎動物起源和進(jìn)化的模式生物。隨著弗羅里達(dá)文昌魚基因組測序的完成,關(guān)于文昌魚的免疫研究將成為研究的熱點(diǎn)。
本研究中,我們在白氏文昌魚中克隆得到了具有完整編碼框的白氏文昌魚COMMD4基因,其全長1008bp,是由一個(gè)含有603個(gè)核苷酸的開放閱讀框(ORF)、一個(gè)11個(gè)核苷酸的5'UTR和一個(gè)含有多聚腺苷酸信號(AAT
3、AAA)的394個(gè)核苷酸的3' UTR組成,其開放閱讀框編碼一個(gè)由200個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì),其羧基端含有該家族特有的典型COMM結(jié)構(gòu)域(第130-198位殘基),預(yù)測其理論相對分子質(zhì)量為22kDa,其理論等電點(diǎn)(pI)為5.81。白氏文昌魚COMMD4蛋白與已經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的其他物種COMMD4蛋白的一致性和相似性分別為38.8%-64.0%,55.5%-82.5%。利用白氏文昌魚COMMD4蛋白的氨基酸序列與其他典型物種的COMMD蛋白
4、的氨基酸序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)生樹分析發(fā)現(xiàn),白氏文昌魚COMMD4蛋白與其他物種的COMMD4蛋白聚為一簇,而與其他COMMD蛋白明顯分開。而白氏文昌魚COMMD4蛋白與其他物種COMMD4蛋白的氨基酸序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)生樹分析,結(jié)果表明,白氏文昌魚COMMD4蛋白處于脊索動物的最底部,這與經(jīng)典分類法相一致。文昌魚COMMD4基因的基因組序列分析表明,在其基因組序列中只有一個(gè)外顯子,這和海鞘的COMMD4基因相同,但與海膽、果蠅和其他脊椎動物不同,
5、在海膽和脊椎動物中,內(nèi)含子的增加和保留可能在一定程度上與其功能有關(guān),但并不清楚在海鞘和文昌魚中的COMMD4基因的6個(gè)內(nèi)含子缺失這一現(xiàn)象的產(chǎn)生,是因?yàn)楹笠七€是因?yàn)橥粗亟M。在八個(gè)物種中的10個(gè)COMMD蛋白家族成員的保守性分析表明,不同物種含有不同的COMMD蛋白家族成員。其中,脊椎動物均含有十個(gè)COMMD蛋白家族成員,而文昌魚缺少COMMD1蛋白,這表明文昌魚可能存在著COMMD1基因的二次丟失,并且這些基因的缺失可能是由不完整的基因
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