1、目的：子癇前期（Preeclampsia，PE）是妊娠期特有的疾病，嚴重危害母兒健康。全球發(fā)病率為3-8％，且各地區(qū)發(fā)病率呈逐年上升趨勢。子癇前期的發(fā)病機制至今尚未完全闡明，研究發(fā)現(xiàn)其與細胞凋亡、血管痙攣，凝血系統(tǒng)激活，炎癥反應等密切相關，而這些病理變化集中表現(xiàn)為胎盤的異常。多數(shù)研究認為，子癇前期的病理變化起始于胎盤“淺著床”和胎盤血管重鑄障礙。研究證實多種胎盤來源的蛋白因子的表達異常參與子癇前期胎盤滋養(yǎng)細胞的功能，如可溶性血管內皮生長

2、因子、胎盤生長因子、HtrA家族、合胞素等，但極少數(shù)被認為是子癇前期病情嚴重程度的預測指標。其中，HtrA4又稱高溫需求蛋白4，是絲氨酸蛋白酶家族成員之一，其分子量為51kDa。高溫時作為蛋白酶降解折疊錯誤的周質蛋白，低溫時顯示蛋白質分子伴侶功能，研究表明HtrA4參與胎盤發(fā)育，被認為是早發(fā)型子癇前期可能的預測指標。而Syncytin-1是由人內源性逆轉錄缺陷病毒(HERV）家族成員HERV-W編碼的包膜蛋白，其分子量為33kDa。高度

3、表達于胎盤合體滋養(yǎng)細胞層，介導胎盤滋養(yǎng)細胞的融合分化，對胎盤發(fā)育具有重要意義。有研究發(fā)現(xiàn)HtrA4通過其PDZ結構域與Syncytin-1的SU亞單位結合，抑制了滋養(yǎng)細胞之間的融合、分化，造成胎盤淺著床，引發(fā)子癇前期。本研究從檢測母血及胎盤組織中HtrA4和syncytin-1的含量變化及其與臨床指標的相關性角度進行研究，探討其對胎盤滋養(yǎng)細胞融合、分化的影響，進而加深對子癇前期發(fā)病機制的了解，并指導臨床診斷和治療。
　　方法：⑴按

4、照《妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）》中重度子癇前期的診斷標準選取2014.02至2015.05于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院產前檢查和住院的重度子癇前期患者74例，發(fā)病孕周<34周的早發(fā)型子癇前期（Early-onset preeclampsia，E-PE）組39例，>34周的晚發(fā)型重度子癇前期（Late onset severe preeclampsia，LS-PE）組35例，同期隨機選取33例健康孕婦作為對照組。⑵所有研究對象在終止妊

5、娠前3天內應用彩色多普勒超聲檢測臍動脈血流動力學參數(shù)：收縮期峰值流速與舒張末期血流速度之比（S/D）、搏動指數(shù)（PI）及阻力指數(shù)（RI）。收集所有研究對象分娩前母血3ml，離心，取上清液，置于-70℃冰箱保存，待測。胎盤娩出后立即取胎盤母面近臍帶根部直徑3cm范圍內的組織，約l x l x lcm大小，生理鹽水沖洗后至10％福爾馬林溶液中室溫固定48h以上，然后進行脫水、石蠟包埋等。⑶采用彩色多普勒超聲測定臍血流動力學參數(shù)S/D、PI、

6、RI；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測母體血漿 HtrA4和 Syncytin-1的表達水平；采用免疫組織化學技術（Immunohistochemistry，IHC）顯微鏡下觀察胎盤中HtrA4和Syncytin-1的表達分布；軟件進行圖像分析得出平均光密度值（Mean optical Density，MOD）。⑷采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料用均數(shù)±標準差（ x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用 SNK檢

7、驗。兩變量之間的相互關系采用 Pearson直線相關性分析。取α=0.05作為檢驗水準，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：①子癇前期患者臍動脈血流S/D、PI、RI值升高，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。早發(fā)組S/D值顯著高于晚發(fā)組和對照組（均P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義；早發(fā)組PI值及RI值顯著高于晚發(fā)組，且晚發(fā)組高于對照組（均P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義；②子癇前期患者血漿中HtrA4表達升

8、高，而Syncytin-1表達降低，與對照組相比，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。早發(fā)組HtrA4表達水平顯著高于晚發(fā)組，且晚發(fā)組高于對照組（均P<0.05）。早發(fā)組Syncytin-1表達水平明顯低于晚發(fā)組，且晚發(fā)組低于對照組（均P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義；③HE染色結果：正常妊娠胎盤可見絨毛成熟良好，形態(tài)飽滿，間質少，絨毛及絨毛間質的血管豐富，形態(tài)正常，合體滋養(yǎng)層細胞核排列較整齊；子癇前期患者胎盤絨毛成熟不良，絨毛血管平滑

9、肌數(shù)量減少，可見玻璃樣變，間質水腫，合體滋養(yǎng)層細胞細胞核排列紊亂；其中早發(fā)組胎盤絨毛數(shù)量更少，可見退變壞死，絨毛外層合體滋養(yǎng)層細胞大片融合；④HtrA4、Syncytin-1在子癇前期患者和正常孕婦胎盤組織中均有表達。HtrA4主要表達于胎盤絨毛小葉的合體滋養(yǎng)細胞及細胞滋養(yǎng)細胞，血管內皮細胞也有少量表達，定位于細胞膜，胞漿中也有少量表達。早發(fā)型子癇前期患者胎盤染色較晚發(fā)型子癇前期深，且二者均較正常孕婦胎盤染色深；Syncytin-1主要

10、表達于胎盤絨毛小葉的合體滋養(yǎng)細胞，定位于細胞膜和細胞漿，子癇前期患者胎盤染色較正常孕婦胎盤淺，且早發(fā)組染色淺于晚發(fā)組；⑤免疫組織化學提示HtrA4、Syncytin-1在試驗組和對照組胎盤中均有表達。二者的表達含量在試驗組和對照組分別進行統(tǒng)計學分析顯示：HtrA4在試驗組 MOD值高于對照組，且早發(fā)組高于晚發(fā)組（均P<0.05），差異有統(tǒng)計學意義；Syncytin-1在試驗組 MOD值低于對照組，且早發(fā)組低于晚發(fā)組（均P<0.05），差

11、異有統(tǒng)計學意義；⑥母血及胎盤組織中HtrA4、Syncytin-1的相關性分析顯示二者均呈負相關（r=-0.413，P<0.001；r=-0.649，P<0.01）；⑦母血及胎盤組織中HtrA4表達水平值與新生兒體重呈負相關；與臍動脈S/D、PI、RI值均呈正相關。Syncytin-1表達水平與新生兒體重呈正相關；與臍動脈S/D、PI、RI值呈負相關。
　　結論：⑴子癇前期患者母血和胎盤組織中 HtrA4水平較正常妊娠者均明顯升高

12、，且早發(fā)組高于晚發(fā)組，而Syncytin-1水平較正常妊娠者均明顯降低，且早發(fā)組低于晚發(fā)組，提示HtrA4和Syncytin-1參與子癇前期的發(fā)病，且與疾病的嚴重程度相關。⑵子癇前期患者母血和胎盤組織中HtrA4與Syncytin-1水平均呈負相關，提示二者在子癇前期的發(fā)生發(fā)展中呈拮抗作用。⑶子癇前期患者母血和胎盤組織中HtrA4水平與新生兒出生體重、臍動脈S/D值、PI值、RI值均呈正相關，而Syncytin-1水平與新生兒出生體重、