1、目的:我們?cè)O(shè)計(jì)并實(shí)施該課題,目的在于研究脊髓損傷后機(jī)體T淋巴細(xì)胞亞群、活化抗原及粘附分子的變化情況,探討SCI與細(xì)胞免疫反應(yīng)的關(guān)系及其機(jī)理;在此基礎(chǔ)上,研究并探討傳統(tǒng)中藥黃芪在急性脊髓損傷中調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)的作用,為該藥在SCI治療中的應(yīng)用提供理論依據(jù).方法:1.利用改良Allen's打擊法建立致傷能量不同的大鼠急性脊髓損傷模型.2.采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)正常對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組(僅行椎板切除而未損傷脊髓)及致傷能量不同的二組脊髓損傷組大鼠傷

2、后不同時(shí)期外周血T淋巴細(xì)胞表型CD<,4>及CD<,8>的表達(dá)水平,研究CD<,4>、CD<,8>、CD<,4>/CD<,8>比值及CD<,4>+CD<,8>值隨時(shí)間變化的規(guī)律及不同致傷能量對(duì)CD<,4>及CD<,8>表達(dá)的影響,進(jìn)一步了解SCI后大鼠細(xì)胞免疫反應(yīng)的改變情況.3.對(duì)二組急性脊髓損傷大鼠,在傷后第12h、36h、5d、6d、7d、8d及9d分別給予生理鹽水注射液和黃芪注射液治療,通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)治療后不同時(shí)期大鼠外周血T

3、淋巴細(xì)胞表型CD<,4>和CD<,8>的表達(dá)水平,來(lái)觀察治療前后細(xì)胞免疫反應(yīng)改變情況.此外觀察胸腺、脾臟的外觀形態(tài)、重量的變化及其組織病理學(xué)變化,研究黃芪注射液對(duì)急性脊髓損傷大鼠細(xì)胞免疫受損的調(diào)節(jié)機(jī)制.4.采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)15例臨床確診的急性脊髓損傷患者外周血淋巴細(xì)胞表型CD<,19>、CD<,3>、CD<,4>、CD<,8>、CD<,69>、CD<,54>及CD<,56>的表達(dá)水平,了解脊髓損傷后患者細(xì)胞免疫功能的改變情況及其機(jī)理.

4、結(jié)論:1.脊髓損傷后早期大鼠的細(xì)胞免疫主要表現(xiàn)為免疫調(diào)節(jié)功能受損,此時(shí)細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,表現(xiàn)為CD<,4>、CD<,4>/CD<,8>比值及CD<,4>+CD<,8>值均明顯降低,這一現(xiàn)象可能是導(dǎo)致傷后機(jī)體容易發(fā)生感染的一個(gè)主要原因.隨著時(shí)間的發(fā)展,大鼠的細(xì)胞免疫反應(yīng)又逐漸恢復(fù),這可能是機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)脊髓損傷的刺激作出了反應(yīng)所致.2.脊髓損傷的嚴(yán)重程度與細(xì)胞免疫反應(yīng)狀態(tài)密切相關(guān),損傷越重,細(xì)胞免疫反應(yīng)越低下,因此CD<,4>及CD<,4

5、>/CD<,8>比例的改變程度與脊髓損傷嚴(yán)重程度相關(guān),尤其是CD<,4>/CD<,8>比值.臨床工作中該值可在患者脊髓損傷后立即測(cè)出,且便捷易行,因此,在今后可試將該值作為早期(如脊髓休克期)判斷患者脊髓損傷嚴(yán)重程度及其預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),該值越低,表面機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)受抑制越明顯,可能代表脊髓受損程度就越為嚴(yán)重,預(yù)后也越差.但目前尚應(yīng)收集大宗臨床病全進(jìn)行相關(guān)性研究以進(jìn)一步證實(shí)該結(jié)論.與之相反,CD<,4>+CD<,8>值可能不適合做早期判

6、斷脊髓損傷嚴(yán)重程度與預(yù)后的指標(biāo).3.脊髓休克期是傷后機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)最低下的"低谷期",此期應(yīng)引起我們足夠的重視.在這一時(shí)期應(yīng)密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞免疫反應(yīng)狀況,并進(jìn)一步研究一些措施來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)受損狀態(tài).4.應(yīng)正確認(rèn)識(shí)黃芪的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用,在動(dòng)物體內(nèi),它可能具有雙向調(diào)節(jié)作用.一方面,黃芪可促使脊髓損傷后外周血T淋巴細(xì)胞CD<,4>表達(dá)明顯地升高,表明它對(duì)細(xì)胞反應(yīng)低下有顯著的提高作用,可作為一種免疫增強(qiáng)調(diào)節(jié)劑,應(yīng)用于免疫反應(yīng)低下?tīng)顟B(tài)的糾正,

7、這也可能是其"扶正固本、補(bǔ)氣養(yǎng)陰"的作用機(jī)制之一;另一方面,過(guò)大劑量的黃芪也可能是種免疫抑制劑,反而可能抑制大鼠的細(xì)胞免疫反應(yīng).這提示我們應(yīng)進(jìn)一步確定不同劑量的黃芪對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)的影響,以獲得最確切最有效的用量.5.脊髓損傷后細(xì)胞免疫反應(yīng)受抑制、低下的原因可能與一般的創(chuàng)傷不完全相同,除內(nèi)分泌系統(tǒng)方面的改變所致外,可能主要與如下兩方面有關(guān):(1)在脊髓損傷的脊髓休克期,機(jī)體的植物神經(jīng)功能暫時(shí)受到抑制,最終導(dǎo)致細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,這種

8、抑制可能是種相對(duì)抑制,隨著脊髓休克期的結(jié)束而逐漸恢復(fù).(2)在脊髓休克期之后,脊髓可能因各種原因?qū)е铝藢?shí)質(zhì)性損壞,從而使得中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳至到免疫器官的信號(hào)途徑受到實(shí)質(zhì)性破壞,使得免疫器官失去神經(jīng)軸的調(diào)節(jié),導(dǎo)致免疫器官如胸腺萎縮、組織結(jié)構(gòu)改變,細(xì)胞排列紊亂,數(shù)量減少,使得胸腺等免疫器官的功能下降,產(chǎn)生至外周血的CD<,4>T淋巴細(xì)胞相應(yīng)明顯減少,導(dǎo)致細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用受損,細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,最終可導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能低下,脊髓損傷后期機(jī)體更易受