1、第一部分人參皂甙Rb1聯(lián)合磷酸川芎嗪對擴張型心肌病的治療作用及機制研究
　　 目的：擴張型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)以左心室或雙心室擴張和心功能減退為特征,其發(fā)病原因與病毒感染、自身免疫、酒精中毒、妊娠、家族遺傳等因素有關,其人群發(fā)病率約為1/2500,占所有心肌病的60％。迄今缺乏有效治療,是心血管疾病的重要死因。為尋找安全高效的治療DCM的藥物,我們把作用于不同靶點的中藥單體人參皂甙Rb1

2、(Ginsenoside-Rb1,Rb1)和磷酸川芎嗪(Tetramethylpyrazine phosphate,TMPP)聯(lián)合應用,以本室建立的cTnTR141W擴張型心肌病轉基因小鼠為模型,研究本中藥單體復方對DCM的治療效果并探討其作用機理。
　　 方法：對2.5月齡的cTnTR141W轉基因小鼠進行心臟超聲檢查,計算左心室收縮末期內徑(the left ventricular end-systole diameter,

3、LVESD)的平均值和95％的可信區(qū)間。我們將95％的可信區(qū)間的上限作為心臟擴張的標準,將LVESD值于95％可信區(qū)間內的轉基因小鼠隨機分成七組:模型對照組,Rb1(40 mg/kg/day)+TMPP(20 mg/kg/day)聯(lián)合組1,Rb1(40mg/kg/day)+TMPP(40mg/kg/day)聯(lián)合組2,Rb1(20mg/kg/day)+TMPP(40 mg/kg/day)聯(lián)合組3,Rb1(40mg/kg/day)組,TMP

4、P(40mg/kg/day)組,陽性對照組[卡托普利(180mg/kg/day)],用同齡的陰性鼠作為正常對照組。各組小鼠連續(xù)給藥2個月并且于2.5,3.5及4.5月齡時進行超聲檢查。在給藥終點即4.5月齡時,進行Kaplan-Meier生存分析,同時各組部分小鼠心臟組織取材,進行H&E染色和Masson染色觀察心肌顯微結構變化,透射電鏡觀察心肌超微結構,RT-PCR(reverse transcription PcR)檢測Ⅰ型膠原(C

5、OL1α1),Ⅲ型膠原(COL3α1),鈣調素1(Calm1),鈣/鈣調素依賴蛋白激酶Ⅱ b(Camk2b)的表達,Westernblot檢測心臟HB-EGF表達水平。
　　 結果：根據(jù)4.5月齡時死亡率及超聲分析結果,聯(lián)合應用組1,即Rb1(40mg/kg/day)+TMPP(20mg/kg/day)組(Rb+TMPP),對模型小鼠擴心表型改善最好,與Rb1和TMPP單方治療組相比,Rb1+TMPP組在心肌細胞排列,間質纖維化

6、及心肌超微結構方面具有更好的改善作用。RT-PCR和Western blot檢測結果顯示與Rb1及TMPP單方相比,Rb1+TMPP組可同時抑制COL1α1,COL3α1,Calm1,Camk2b和HB-EGF的表達,而Rb1治療組主要抑制HB-EGF的表達,TMPP治療組主要抑制Calm1和Camk2b的表達。
　　 結論：與Rb1及TMPP單方相比,Rb1與TMPP聯(lián)合應用在改善模型小鼠死亡率,心室擴張,收縮功能失調,間質纖