1、RNA干擾(RNAi，RNAinterference)是dsRNA介導(dǎo)的特異性基因表達(dá)沉默現(xiàn)象，是生物界一種古老而且進(jìn)化上高度保守的基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制。RNAi在生物體中普遍存在，原蟲(chóng)、線蟲(chóng)、真菌、昆蟲(chóng)以及哺乳類(lèi)動(dòng)物中都已發(fā)現(xiàn)RNAi現(xiàn)象。 本研究將IE-1基因+18～+446區(qū)以反向串聯(lián)方式連接，構(gòu)建在細(xì)胞內(nèi)能利用IE-1基因啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄形成發(fā)夾狀dsRNA的RNAi表達(dá)載體pSK-IE，和轉(zhuǎn)基因RNAi載體pigA3-IE-Ne

2、o。將pSK-IE轉(zhuǎn)染細(xì)胞，注射蠶蛹均表現(xiàn)出對(duì)BmNPV抑制作用。表明IE．1啟動(dòng)子可以用作構(gòu)建RNAiDNA載體的啟動(dòng)子，轉(zhuǎn)染效率的高低直接影響到RNAi的檢測(cè)。用pigA3-IE-Neo轉(zhuǎn)染細(xì)胞，G418篩選4個(gè)月，獲得了轉(zhuǎn)oigA3-IE-Neo細(xì)胞，陽(yáng)性率可達(dá)到80％。感染BmNPV后，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞相比正常細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)BmNPV更強(qiáng)的抑制作用。另外，克隆了BmNPV的alk-exo基因，并構(gòu)建了基于alk-exo基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)；