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文檔簡介
1、表面等離體激元共振(surface plasmon resonance,SPR)生物傳感器是一種常用于測量生物、化學(xué)變化的光學(xué)傳感器,可檢測生物大分子相互作用(蛋白和蛋白、蛋白和DNA、DNA和DNA等),在醫(yī)療診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。用于生物大分子相互作用檢測的傳統(tǒng)方法(如ELISA、RIA等)大多操作復(fù)雜、需要標(biāo)記、耗時長、樣品耗費(fèi)量大,而SPR傳感檢測則具有免于標(biāo)記、實時檢測、樣品消耗量低等優(yōu)點(diǎn),成為生物化學(xué)
2、傳感器領(lǐng)域的一個研究熱點(diǎn)。
自20世紀(jì)80年代以來,國外關(guān)于SPR檢測生物化學(xué)分子相互作用的研究逐漸增加,目前市面上已有商品化的SPR傳感儀器。國內(nèi)對SPR傳感儀器的研究稍晚,但相關(guān)研究也越來越得到廣泛重視。現(xiàn)有SPR傳感器大都體積龐大,不便于攜帶,是只適用于實驗室研究的傳感平臺,研究開發(fā)一種小型便攜的SPR生物傳感器對其在現(xiàn)場檢測、臨床檢驗等方便的應(yīng)用有重要意義。
本文的目的在于研制一款基于角度調(diào)制模式的小型便攜S
3、PR傳感儀器,為實現(xiàn)儀器小型化進(jìn)行如下幾個方面的設(shè)計:第一,為達(dá)到一定的檢測精度,儀器的SPR檢測模式為角度調(diào)制。通過特定棱鏡設(shè)計,改變傳統(tǒng)SPR儀器通過龐大轉(zhuǎn)角設(shè)備得到多角度的方式,使用聚焦準(zhǔn)直入射光束實現(xiàn)多角度入射;第二,縮短光路,使用聚焦能力較強(qiáng)的平凸透鏡使光束在極短光路內(nèi)匯聚一點(diǎn),從而減小整體體積;第三,光源選擇,選擇性能穩(wěn)定與體積較小的半導(dǎo)體激光器作為光源;第四,使用不規(guī)則四邊形棱鏡來實現(xiàn)光源與檢測器同一方向集成,縮小體積。<
4、br> 本文研究中,首先開展光路設(shè)計,建立小型化SPR傳感檢測模型,并通過MATLAB仿真軟件來確定實驗儀器各部分重要參數(shù),包括棱鏡材質(zhì)(折射率)、傳感芯片吸附層(鉻層)的鍍積厚度、金屬膜材質(zhì)以及金屬膜鍍積厚度。然后,嘗試設(shè)計并使用不規(guī)則四邊形棱鏡搭建平臺進(jìn)行氣液相測試,測試表明不規(guī)則四邊形棱鏡無法同時滿足液相環(huán)境的檢測和便于機(jī)械固定與攜帶的要求。因而最終使用半圓柱棱鏡來進(jìn)行小型SPR傳感儀器的搭建。搭建好的儀器原型的尺寸為290mm
5、(L)×190mm(W)×130mm(H),凈重3kg。
流通池的制作也是實驗中非常關(guān)鍵的步驟,這是實驗?zāi)芊癯晒焖偻瓿傻谋WC。流通池的制作需要達(dá)到不出現(xiàn)液體滲漏以及樣品耗費(fèi)量少的目標(biāo),本文中采用PMMA壓板與硅橡膠墊圈結(jié)合的方式組成流通通道池,硅橡膠墊圈具有良好的密封性,可實現(xiàn)與傳感芯片和PMMA壓片的緊密貼合,避免出現(xiàn)漏液現(xiàn)象。同時流通池尺寸控制為10mm(L)?1mm(W)?1mm(D),耗液量較少。
完成小型
6、SPR傳感儀器的組裝后,實現(xiàn)對軟件采集界面的二次開發(fā)。MFC軟件界面可以同時檢測各個像素點(diǎn)在同一時刻的光強(qiáng)值差異,以及檢測規(guī)定像素點(diǎn)隨時間變化的光強(qiáng)值。同時,軟件可實現(xiàn)數(shù)據(jù)處理功能,通過與MATLAB聯(lián)合編程的方式,調(diào)用MATLAB內(nèi)部函數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理以提高效率。
針對所建立的小型化SPR傳感裝置開展儀器性能測試。首先用不同濃度乙醇溶液進(jìn)行校準(zhǔn),分析儀器靈敏度;然后利用BSA蛋白作為樣本進(jìn)行檢測,完成SPR儀器穩(wěn)定性、重復(fù)性以
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