1、分類號(hào)：密級(jí)：學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：10165201211001100遣掌師耗火學(xué)碩士學(xué)位論文⑦遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達(dá)作者姓名：學(xué)科、專業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：研究黃楠細(xì)胞生物學(xué)糖生物學(xué)樸君教授2015年3月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要在本實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的遼寧絨山羊毛囊興盛期cDNA質(zhì)粒文庫中，經(jīng)拼接測通后得到了遼寧絨山羊proteasomematurationprotein(POMP)基因序列，旨在研究遼寧絨山羊PMOP基

2、因在毛囊發(fā)育與絨毛生長中的作用。首先對(duì)POMP基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析，然后利用原位雜交技術(shù)對(duì)其進(jìn)行定位分析；RTPCR檢測POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中表達(dá)信號(hào)；RealTimePCR檢測該基因在毛囊發(fā)育的三個(gè)階段的表達(dá)以及加入外源褪黑激素和FGF5以及IGF1三種因子對(duì)遼寧絨山羊成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后細(xì)胞中POMP基因的表達(dá)量變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：生物信息學(xué)分析表明，遼寧絨山羊POMP基因全長1278bp，編碼141個(gè)氨基酸，該

3、蛋白基因與牛屬同源性最高；原位雜交結(jié)果顯示，在初、次級(jí)毛囊中，POMP在內(nèi)根鞘中表達(dá)強(qiáng)烈，在皮質(zhì)層、角質(zhì)層以及髓質(zhì)中也存在表達(dá)，外根鞘中未出現(xiàn)表達(dá)信號(hào)；RTPCR顯示，POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中均有表達(dá)；RealTimePCR檢測結(jié)果顯示，在遼寧絨山羊絨毛生長興盛期和退行期，POMP基因次級(jí)毛囊中的表達(dá)量均高于初級(jí)毛囊中的表達(dá)量；外源褪黑激素、FGF5以及IGF5細(xì)胞因子分別處理成纖維細(xì)胞結(jié)果顯示，分別加入外源褪黑激素和I

4、GF1后POMP基因表達(dá)量低于對(duì)照組，加入10^r5)g／t外源FGF5在處理羊成纖維細(xì)胞24小時(shí)后，POMP基因的表達(dá)量高于對(duì)照組。此外，褪黑激素和FGF5協(xié)同處理細(xì)胞后POMP的表達(dá)量低于對(duì)照組，褪黑激素與IGF一1協(xié)同作用于成纖維細(xì)胞后POMP基因表達(dá)量高于對(duì)照組。結(jié)論：POMP基因普遍存在于遼寧絨山羊各組織器官中，且參與調(diào)控初、次級(jí)毛囊發(fā)育的過程；外源褪黑激素和IGF1能夠抑制POMP基因的表達(dá)；lO^(5)g／L外源FGF5作