1、淡色庫蚊（Culex pipiens pallens）是我國騷擾性家棲優(yōu)勢蚊種，主要分布在中國的中東部和北部地區(qū)，是乙型腦炎、班氏絲蟲病和西尼羅病毒的傳病媒介。目前控制蚊子危害主要依賴于化學(xué)合成殺蟲劑，其中以擬除蟲菊酯類殺蟲劑廣泛使用的殺蟲劑，但是它們的大量使用，使許多害蟲陸續(xù)產(chǎn)生了抗藥性，并逐漸出現(xiàn)交互抗性、多重抗性，甚至出現(xiàn)聯(lián)合抗性，深入研究抗性的分子和生理生化機理對于建立高敏感的抗性檢測方法和制定綜合防治措施具有重要意義。

2、　　本研究的主要內(nèi)容包括以下五個方面：對本實驗室飼養(yǎng)的淡色庫蚊幼蟲和成蚊的抗性測定；對淡色庫蚊Na+通道不同結(jié)構(gòu)域片段ⅠS6、ⅡS4-S6、ⅡS全長片段和ⅢS6的基因克??；比較不同齡期與性別的蚊蟲體內(nèi)羧酸酯酶（CarE）、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶（GSTs）、O-脫甲基酶和乙酰膽堿酯酶（AChE）的酶活力測定；最后通過氯氰菊酯和溴蟲腈的單劑，以及與PBO復(fù)配來測定對淡色庫蚊的生物防治效果。
　　對淡色庫蚊的幼蟲和成蚊的生物測試中，處理24h

3、后，CR品系幼蟲和成蚊點滴及接觸筒的抗性系數(shù)分別為376.79、22.98和62.73，呈顯著性差異，已達到較高的抗藥性水平。
　　通過查找相關(guān)序列設(shè)計擊倒抗性（kdr）引物，成功克隆除了Na+通道不同結(jié)構(gòu)域的基因片段，分別為333bp的ⅠS6基因片段、371bp的ⅡS4-6基因片段、701bp的ⅡS基因片段和666bp的ⅢS6基因片段。按照推定的氨基酸差異只在ⅡS4-S6和ⅢS6，ⅠS6并無氨基酸的差異，其中ⅡS4-S6是已發(fā)現(xiàn)

4、的突變位點，并與蚊蟲抗藥性有關(guān)，但在ⅢS6并沒有報道存在本實驗克隆的突變位點，該位點是否與抗藥性有關(guān)以及相關(guān)性情況如何還需進一步進行功能方面的深入細致的研究。
　　無論是CR品系還是SS品系，隨著齡期的增長，蛋白質(zhì)含量升高，在蛹期蛋白質(zhì)含量為最高，為13.22μg/μl和14.17μg/μl。兩種品系的蛋白質(zhì)含量在幼蟲和蛹期無差異，成蚊有差異，CR品系均高于SS品系，且雌成蚊均高于雄成蚊。對蚊蟲的酶活力測定，在幼蟲期，CarE和O

5、-脫甲基酶的比活力，CR品系高于SS品系；在蛹期，CarE、O-脫甲基酶和GSTs的比活力，CR品系顯著高于SS品系；在雌成蚊中，這3種酶CR品系均高于SS品系，另外還發(fā)現(xiàn)AChE也有差異；在雄成蚊中，也發(fā)現(xiàn)O-脫甲基酶和GSTs比活力差異顯著。齡期不同，每種品系的酶活力有差異，分化的性別不同，也呈現(xiàn)了某些酶活力的差異。
　　對淡色庫蚊幼蟲和成蚊具有亞致死劑量的增效醚（PBO）濃度，其結(jié)果選擇的幼蟲幼蟲浸漬法的增效醚濃度為100p

6、pm、成蚊點滴法為0.2％和WHO接觸筒法為10%。
　　氯氰菊酯與PBO復(fù)配的對淡色庫蚊SS品系和CR品系的幼蟲的增效呈顯著性差異，24h的增效系數(shù)為6.97和115.32，成蚊點滴法的為3.62和18.26，WHO接觸筒法的為3.94和443.64。
　　溴蟲腈是一種慢效低毒的殺蟲劑，觀察時間大約在72h。作為單劑使用時，對兩種品系的藥效相當，處理72h后，幼蟲的抗性系數(shù)為1.2，成蚊點滴法為1.23，成蚊接觸筒法為1.

7、33，無統(tǒng)計差異。氯氰菊酯與具有亞致死劑量的PBO復(fù)配時, SS品系和CR品系幼蟲24h后的的增效系數(shù)為6.97和115.32，成蚊點滴法的為3.62和18.26，成蚊WHO接觸筒法的為3.94和443.64，增效作用均呈顯著性差異，表明PBO對氯氰菊酯具有明顯的增效作用。溴蟲腈與PBO復(fù)配后，幼蟲和成蚊均出現(xiàn)拮抗作用，表明溴蟲腈與氯氰菊酯對淡色庫蚊無交互抗性，顯示了對抗氯氰菊酯淡色庫蚊較好的防治效果。將氯氰菊酯與溴蟲腈復(fù)配，測定復(fù)配試