1、目的:
　　在中醫(yī)“腎主骨”以及骨折“瘀去、新生、骨合”理論指導下，探討補腎活血湯促進骨折愈合的機理。通過對目前最新文獻進行研究，觀察補腎活血湯對老年性橈骨遠端骨折的臨床療效，同時進行動物、細胞實驗深入探索促進骨折愈合的方法，為中醫(yī)藥治療骨缺損、骨折延期愈合或骨不連、骨壞死及骨折長期制動后出現的廢用性骨質疏松等難治性骨病提供新思路和理論依據。
　　方法:
　　一、文獻研究
　　間充質干細胞(Mesenchymal

2、 stem cells，MSCs)是骨折愈合過程中最重要的細胞基礎，具有強大的自我增殖、多向分化、損傷歸巢、組織修復能力，由于其可以向成骨、軟骨細胞分化，促進骨折的愈合而成為目前研究的熱點。趨化因子是一類可以趨化細胞定向遷移的小分子分泌蛋白，近年來發(fā)現趨化因子及其受體具有誘導MSCs向損傷、炎癥、缺血等部位遷移歸巢、參與組織的修復的作用。因此，歸納、總結誘導MSCs定向遷移的趨化因子，初步了解其作用機制，對于探索促進骨折愈合的方法具有積

3、極意義。
　　二、實驗研究
　　制備SD大鼠股骨中段骨折模型，補腎活血湯灌胃治療7天、14天、21天后分離、培養(yǎng)骨折端MSCs，經免疫熒光，成骨、成脂分化鑒定，傳至第3代采用Transwell體外遷移實驗檢測補腎活血湯對骨折端MSCs體外遷移的影響，Western Blot、qPCR檢測MSCs趨化因子表面受體CCR2的表達。
　　三、臨床研究
　　按隨機數字表法將60例老年性橈骨遠端骨折患者分為治療組、對照組，

4、骨折復位、穩(wěn)定固定后，治療組予補腎活血湯內服4周，對照組不服中藥，其他治療與治療組保持一致。通過定期X-ray復查進行橈骨遠端骨折愈合評分(Radius union scoringsystem，RUSS)，確定骨折愈合時間，骨折愈合后采用Gartland-Werley、PRWE(patient-rated wrist evaluation)評分標準對腕關節(jié)功能進行評價。
　　結果:
　　一、文獻研究
　　趨化因子及其受

5、體多渠道的相互作用的方式意味著MSCs在移行的每一階段都受到單個或多個趨化因子及其受體的影響，阻斷趨化因子配體與受體結合這一途徑可導致MSCs移行方向的改變或移動受阻。同時，我們在許多趨化因子受體激活劑的實驗研究中可以看到，往往單個趨化因子的激活就能明顯地促進MSCs遷移歸巢。因此，明確各種趨化因子在骨折微環(huán)境中是否有表達以及表達的規(guī)律如何，不但可以篩選出誘導MSCs向骨折部位定向遷移的關鍵趨化因子，也可以進一步闡明內源性MSCs向骨損

6、傷部位定向遷移歸巢促進骨修復的相關機制。同時，如果能夠掌握相關趨化因子的表達規(guī)律和作用機制，運用中藥補腎活血湯調節(jié)相關趨化因子及其受體的表達，將為中醫(yī)藥治療骨折、骨缺損，促進骨折愈合帶來新的前景。
　　二、實驗研究
　　骨折端MSCs經細胞表面抗原免疫熒光以及成骨、成脂分化能力鑒定，可證實為間充質干細胞。補腎活血湯治療后第7天、14天，骨折端MSCs體外遷移能力明顯加強，與模型組、對照組比較，差異有統計學意義。第21天，骨折

7、端MSCs體外遷移能力有所減弱，與模型組比較，差異無統計學意義。Western Blot、qPCR結果顯示，補腎活血湯治療第7、14天，MSCs表面受體CCR2表達均有上升，與模型組、對照組比較，差異有統計學意義。第21天，治療組與模型組比較，差異無統計學意義。
　　三、臨床研究
　　RUSS評分，第2、4、6周治療組與對照組比較，差異有統計學意義，第8周兩組比較，差異無統計學意義;治療組（5.18±1.02周）與對照組(5

8、.97±1.02周)骨折愈合時間比較，差異有統計學意義;Gartland-Werley評分，治療組(6.18±2.70)與對照組(8.03±2.18)兩組比較，差異有統計學意義;PRWE評分，治療組(14.61±4.18)與對照組(18.72±3.84)，兩組比較，差異有統計學意義。
　　結論:
　　一、多種趨化因子及其受體的結合可以誘導MSCs的遷移歸巢從而參與骨折的損傷修復，研究其表達規(guī)律及其作用機制，對于探索促進骨折愈