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![復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方及其活性成分對(duì)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型NF-κB通路的作用及機(jī)制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/281e1b22-d4bf-4c27-ab31-f2a4abe73120/281e1b22-d4bf-4c27-ab31-f2a4abe731201.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:
胰島素抵抗是滋生糖尿病、高血壓、冠心病等多種代謝性相關(guān)疾病的共同土壤。中藥復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(FTZ)已經(jīng)被用于治療和改善高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化等一系列代謝相關(guān)疾病。前期研究證明 FTZ可以有效改善高胰島素誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗癥狀。女貞子作為FTZ中的主要藥物,具有治療高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化的作用;其主要有效活性成分齊墩果酸(OA)亦有一定的改善胰島素抵抗的作用,但是具體作用機(jī)制尚不清楚。
目的:
2、r> 觀察 FTZ及其方中主要活性成分齊墩果酸對(duì)胰島素抵抗 HepG2細(xì)胞的作用,并從對(duì)核因子κB(NF-κB)—胰島素受體底物1(IRS1)—葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)受體4(GLUT4)的蛋白表達(dá)的影響,探討其作用機(jī)制。
方法:
采用游離脂肪酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞使其產(chǎn)生胰島素抵抗,用高中低三個(gè)劑量的FTZ干預(yù)后,用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中葡萄糖的含量,用ELISA檢測(cè)HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液中腫瘤壞死因子-α
3、(TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)的含量,用Western blot檢測(cè)HepG2細(xì)胞中NF-κB、IRS1、GLUT4的蛋白表達(dá)。并采取NF-κB的特異性抑制劑PDTC對(duì)其進(jìn)行阻斷,再檢測(cè)下游靶點(diǎn)IRS1的蛋白表達(dá)變化。用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)FTZ方中重要藥材女貞子及其有效活性成分齊墩果酸對(duì)胰島素抵抗的作用效果,并選取齊墩果酸進(jìn)行上述靶點(diǎn)的檢測(cè),探索齊墩果酸改善游離脂肪酸誘導(dǎo)的胰島素抵抗 HepG2細(xì)胞的作用機(jī)制。
結(jié)
4、果:
模型細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量高于正常細(xì)胞(P<0.01)。給予FTZ或OA后,HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液上清液葡萄糖含量低于模型組葡萄糖含量(P<0.05);HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中TNF-α和IL-6的含量較模型組降低(P<0.05);同時(shí)較模型組相比下調(diào)NF-κB的蛋白表達(dá)(P<0.01),上調(diào)IRS1的蛋白表達(dá)(P<0.01)和GLUT4的蛋白表達(dá)(P<0.01)。在阻斷NF-κB之后,再加入FTZ或OA,IRS
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