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文檔簡介
1、目的:虎眼萬年青是一種天然中草藥植物,其多種化學成分已被證實具有強效抗癌活性,探討虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物對人非小細胞肺癌H1299細胞增殖抑制、凋亡作用及機制。
方法:應用MTT法測定不同濃度、不同時間段虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物對人肺腺癌H1299細胞株的增殖抑制作用;倒置顯微鏡觀察肺癌H1299細胞形態(tài)變化,熒光顯微鏡觀察H1299細胞凋亡變化;流式細胞術觀察虎眼萬年青醇提物對H1299細胞的凋亡誘導作用;Western
2、Blot檢測經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細胞凋亡相關蛋白(Bcl-2、Bax、Bad蛋白)的表達情況;實時熒光定量法(RT-PCR)檢測經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細胞凋亡相關基因(Bcl-2、Bax、Bad)的表達情況。
結(jié)果:MTT結(jié)果顯示,虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物作用于人肺腺癌H1299細胞后,48h及72h濃度為0.5、1、2、5、10mg/mL時細胞活性與空白對照組相比明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學意義(P<
3、0.05、P<0.01);溶媒組(DMSO<0.1%)與空白對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。倒置顯微鏡顯示加藥組細胞生長明顯受抑制,細胞形態(tài)發(fā)生改變;熒光顯微鏡及流式細胞術顯示,虎眼萬年青鱗莖及葉醇提物正丁醇相可促進H1299細胞凋亡;Western Blot結(jié)果顯示經(jīng)虎眼萬年青醇提物處理后H1299細胞中Bcl-2蛋白表達下降、Bax蛋白無明顯變化、Bad蛋白表達升高,Bax/Bcl-2比值升高;實時熒光定量法(RT-P
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