1、布氏錐蟲是一種原生寄生生物，通過(guò)采采蠅在哺乳動(dòng)物間傳播，在撒哈拉以南的非洲地區(qū)引起人的嗜睡癥和牛的那加那病，對(duì)人的健康和經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來(lái)巨大危害，目前還沒(méi)有針對(duì)錐蟲病的有效藥物。本論文研究的主要對(duì)象是布氏錐蟲未知蛋白Q38FZ4和Alba，希望通過(guò)對(duì)它們結(jié)構(gòu)和功能的研究來(lái)為治療錐蟲病開(kāi)辟新的道路。
　　Q38FZ4是布氏錐蟲中一個(gè)由85個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的可溶蛋白，對(duì)血液型和前循環(huán)型的錐體蟲都十分重要。Q38FZ4與哺乳動(dòng)物中蛋白的序列

2、同源性非常低，而在動(dòng)基體目寄生生物中該蛋白具有高度的保守性，是抗錐蟲藥物的潛在靶點(diǎn)。我們用核磁共振技術(shù)解析了Q38FZ4的溶液結(jié)構(gòu)，Q38FZ4蛋白具有一個(gè)由3個(gè)平行/反平行的β折疊片組成的β折疊片層，和1個(gè)斜跨該β片層的長(zhǎng)螺旋以及分布在四周的4個(gè)小螺旋。我們通過(guò)RNA干擾對(duì)Q38FZ4進(jìn)行敲除后，布氏錐蟲細(xì)胞的生長(zhǎng)受到抑制，說(shuō)明它對(duì)布氏錐蟲的生長(zhǎng)十分重要。在熒光顯微鏡下，我們觀察到帶eYFP標(biāo)簽的Q38FZ4蛋白僅在細(xì)胞分裂間期定位于

3、溶酶體上。在對(duì)帶不同標(biāo)簽的Q38FZ4蛋白進(jìn)行串聯(lián)親和純化實(shí)驗(yàn)中，多種溶酶體蛋白和微管相關(guān)蛋白被分別純化出來(lái)，說(shuō)明Q38FZ4參與溶酶體中的物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程。
　　Alba家族蛋白是一類廣泛分布在古細(xì)菌和眾多真核生物中的以二聚體形式存在的核酸結(jié)合蛋白。這些蛋白能與核糖體亞基、翻譯因子、其他RNA結(jié)合蛋白相互作用，通過(guò)控制基因的表達(dá)來(lái)參與各種調(diào)節(jié)通路。布氏錐蟲中鑒定出了4種Alba蛋白，它們是TbAlba1-4。我們得到了TbAlba1

4、的晶體，并收集到了一套分辨率為2.7 A的衍射數(shù)據(jù)。我們通過(guò)GST pull down和ITC實(shí)驗(yàn)確定了布氏錐蟲Alba蛋白間的相互作用及競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合關(guān)系。我們還發(fā)現(xiàn)TbAlba3和TbAlba4能結(jié)合布氏錐蟲中特定分子量大小的RNA，而TbAlba1和TbAlba2卻無(wú)法結(jié)合RNA，由此推測(cè)TbAlba3-4結(jié)合RNA的能力與它們C端的RGG重復(fù)序列有關(guān)。此外，它們?cè)谂cTbAlba1或TbAlba2形成異二聚體后結(jié)合RNA的范圍得到提高。