1、背景:
　　結(jié)直腸癌是最常見(jiàn)的消化道腫瘤之一，其發(fā)病率和癌癥相關(guān)死亡率在各類腫瘤中居于前列。結(jié)直腸癌的治療手段包括手術(shù)、放療、化療，但其生存預(yù)后仍不樂(lè)觀。5-氟尿嘧啶作為臨床結(jié)直腸癌化療的一線用藥，其作用機(jī)制是通過(guò)抑制胸苷酸合酶的活性，影響DNA的合成。一部分患者由于原發(fā)性和繼發(fā)性對(duì)5-氟尿嘧啶治療形成耐藥，導(dǎo)致化療失敗，腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。FOXM1隸屬于叉頭框轉(zhuǎn)錄因子家族，在多種腫瘤化療藥物的耐受中發(fā)揮重要作用，但FOXM1對(duì)結(jié)直腸

2、癌與5-FU耐藥的作用和機(jī)制尚未明確。
　　方法:
　　1、基因芯片分析在5-FU治療敏感和不敏感的臨床標(biāo)本中的差異基因。
　　2、分析FOXM1在結(jié)直腸癌細(xì)胞系中的表達(dá)含量和IC50之間的相關(guān)性。
　　3、選取細(xì)胞系中FOXM1表達(dá)含量高的兩株細(xì)胞和HCT-8/5-FU耐藥株，轉(zhuǎn)染慢病毒包裝的sh-FOXM1;FOXM1表達(dá)低的兩株細(xì)胞，轉(zhuǎn)染慢病毒包裝的FOXM1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒。驗(yàn)證干擾和過(guò)表達(dá)效率，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的

3、細(xì)胞，檢測(cè)5-FU的IC50值，平板克隆形成率，細(xì)胞凋亡水平。
　　4、選取FOXM1過(guò)表達(dá)的細(xì)胞系，裸鼠皮下種植，待腫瘤長(zhǎng)到一定體積后予以裸鼠腹腔內(nèi)注射5-FU和相關(guān)藥物，測(cè)量腫瘤體積大小，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線，移植瘤做免疫組化檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。
　　5、利用生物信息學(xué)方法篩選參與5-FU代謝相關(guān)的并且啟動(dòng)子區(qū)域具有FOXM1結(jié)合位點(diǎn)的基因，ChIP實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證FOXM1對(duì)靶基因ABCC10的調(diào)控。
　　6、干擾下游靶

4、基因，檢測(cè)IC50值和凋亡相關(guān)變化，功能拯救實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證FOXM1通過(guò)調(diào)控該靶基因參與5-FU的化療耐受。
　　7、臨床樣本。
　　結(jié)果:
　　經(jīng)基因芯片篩選和驗(yàn)證，F(xiàn)OXM1在5-FU不敏感的臨床樣本中表達(dá)含量高;結(jié)直腸癌細(xì)胞系中FOXM1的表達(dá)含量與5-FU的IC50值呈正相關(guān);干擾FOXM1能增強(qiáng)結(jié)直腸癌細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性，抑制5-FU作用下克隆形成率，增加5-FU引起的細(xì)胞凋亡，反之過(guò)表達(dá)FOXM1能抑制結(jié)直腸

5、癌細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)過(guò)表達(dá)FOXM1能增強(qiáng)結(jié)直腸癌移植瘤對(duì)5-FU的耐受性;機(jī)制研究表明FOXM1通過(guò)轉(zhuǎn)錄調(diào)控ABCC10的表達(dá)增強(qiáng)結(jié)直腸細(xì)胞對(duì)5-FU的耐受性，ABCC10抑制劑Vardenafil協(xié)同5-FU腹腔注射，能恢復(fù)5-FU耐藥移植瘤的化療反應(yīng)性。
　　討論:
　　近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)FOXM1參與吉非替尼、順鉑、多西他賽、表柔霉素等多種化療藥物的耐受，本課題第一次提出FOXM1在5-FU的化療