1、目的：本實(shí)驗(yàn)探討二甲雙胍(Metformin,Met)對軟脂酸(palmitic acid,PA)誘導(dǎo)損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞是否具有保護(hù)作用，并對其可能發(fā)生的機(jī)制做進(jìn)一步研究，為糖尿病合并心血管病患者的治療提供新思路和靶點(diǎn)。
　　方法:（1）將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）分為5組，依次為空白對照組（常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)）、PA組（300μmol/L）、低濃度Met

2、(1mmol/L)+PA聯(lián)合組、中濃度Met(2mmol/L)+PA聯(lián)合組、高濃度Met(4mmol/L)+PA聯(lián)合組，在無血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)24小時(shí)后用CCK-8法測定各組細(xì)胞活性。（2）用蛋白質(zhì)印跡法(Westenblot)測定各組細(xì)胞核因子κB（nuclear factorκB p65，NFκB p65）、細(xì)胞間黏附因子（Intercellular cell adhesion molecule1，ICAM1)、核因子κB抑制蛋白（i

3、nhibitor of NF-κB alpha，IκBα）、磷酸化核因子κB抑制蛋白（p-IκBα），腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK）和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）的蛋白表達(dá)。（3）用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法測定各組細(xì)胞單核細(xì)胞趨化因子（Chemokine ligand2，CCL2)和細(xì)胞間黏附因子（ICAM1)

4、的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）NFκB p65的蛋白表達(dá)量：與對照組相比，PA組表達(dá)量明顯升高（P<0.05）；與PA組相比，Met+PA聯(lián)合組細(xì)胞表達(dá)量明顯降低（P均<0.05），其中中濃度Met+PA聯(lián)合組較其他濃度Met+PA聯(lián)合組蛋白表達(dá)量更低（P均<0.05）。（2）p-IκBα的蛋白表達(dá)量：與對照組相比，PA組表達(dá)量明顯升高（P<0.05）；與PA組相比，Met+PA聯(lián)合組細(xì)胞表達(dá)量明顯降低（P均<0.05），其中

5、中濃度Met+PA聯(lián)合組較其他濃度Met+PA聯(lián)合組蛋白表達(dá)量更低（P均<0.05）。（3）ICAM1的蛋白表達(dá)量：與對照組相比，PA組表達(dá)量明顯升高（P<0.05）；與PA組相比，Met+PA聯(lián)合組細(xì)胞表達(dá)量隨Met濃度梯度增高而遞減（P均<0.05）。（4）p-AMPK的蛋白表達(dá)量：與對照組和PA組相比，Met+PA聯(lián)合組細(xì)胞隨著Met濃度梯度的增加，其蛋白表達(dá)量顯著增高（P均<0.05）,其中中濃度Met+PA聯(lián)合組較其他濃度Me

6、t+PA聯(lián)合組蛋白表達(dá)量更高（P均<0.05）。（5）ICAM1的mRNA表達(dá)量：與對照組相比，PA組表達(dá)量有所增加（P<0.05）；與PA組相比，Met+PA聯(lián)合組表達(dá)量隨Met濃度梯度的升高而減少（P均<0.05）。（6）CCL2的mRNA表達(dá)量：與對照組相比，PA組表達(dá)量顯著增加（P<0.05）；與PA組相比，Met+PA聯(lián)合組表達(dá)量隨Met濃度梯度的升高而減少（P均<0.05）。
　　結(jié)論：二甲雙胍可以通過抑制NFκB通路