1、論文獨(dú)創(chuàng)性聲明明：所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了并表示了謝意。研究生簽名：弋眇澎≯加年莎月≯2，日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)

2、構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意i四)Jl農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。論文作者簽名：Ⅵ礦≯易新躲≯哆時(shí)間：加／年鄉(xiāng)月Z≥日時(shí)間：∥7汐年莎月盔2El中文摘要ⅢIllrlrllrlrlJIIIJIIIIIIIIIFJuPY1801503采用16SrDNAPCRRFLP和16“23SrDNA的ISRPCRRFLP分析技術(shù)研究

3、了分離自川西高原自然發(fā)酵牦牛酸奶子中的82株乳酸菌和11株參比菌株的遺傳多樣性，并用16SrDNA基因序列分析技術(shù)研究了供試菌株與參比菌株的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。在對(duì)82株供試菌株的單株發(fā)酵乳的口感比對(duì)，酸度測(cè)定、凝乳時(shí)間的基礎(chǔ)上，篩選出6株凝乳質(zhì)量好，具有良好口感的乳酸菌株，并對(duì)其發(fā)酵特性及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進(jìn)行了研究，結(jié)果如下：116SrDNA基因擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切分析表明，在用于酶切試驗(yàn)的5種酶中，MspI酶切條帶最豐富，所揭示的遺傳信息量大，能很

4、好地揭示供試菌株的遺傳多樣性。依酶切結(jié)果聚類和代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究結(jié)果，供試菌株在61％相似水平上可分為4個(gè)類群，類群I、II、Ⅳ為主要類群，類群I和Ⅳ菌株為乳桿菌屬(Lactobacillus)，類群Ⅱ?yàn)槟c球菌屬(Enterococcus)。如果按81％的相似系數(shù)聚類，供試菌株可聚類16個(gè)群。酶切結(jié)果顯示，供試菌株共有23種16SrDNA遺傳型，其中編號(hào)為1，3，7和15的遺傳型是主要遺傳型，編號(hào)為7的遺傳型共40株，占供試菌株

5、的42％。4個(gè)16SrDNA主要遺傳型(編號(hào)1、3、7和15)，在按61％相似水平的聚類中，編號(hào)1、3和15的三個(gè)主要遺傳型16SrDNA菌株是第1類群的主要菌株；編號(hào)為7的遺傳型菌株全部為第Ⅳ群菌株。按照81％相似水平聚類的分群結(jié)果，對(duì)各類群代表菌株進(jìn)行16SrDNA序列分析，供試菌株中可能有植物乳桿菌(Lactobacillusplantarun)或戊糖乳桿菌(Lactobacilluspentosus)、干酪乳桿菌群(Lactob

6、acilluscaseiGroup)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)、副干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)以及耐久腸球菌(Enterococcusdurans)等類群。2依供試菌株的16SrDNA基因酶切分析聚類的各類群代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育研究結(jié)果表明，代表菌株與典型菌株的16SrDNA基因序列的相似度基本都在98％以下，顯示出川西高原