1、目的：Talin-1是一種大分子骨架蛋白，其能促進肝癌的進展。然而Talin-1促進肝癌進展的機制目前尚無報道。本文通過人全基因芯片分析比較肝癌細胞和敲低Talin-1的肝癌細胞的全基因表達譜來分析Talin-1促進肝癌發(fā)生發(fā)展的潛在機制。
　　方法：分別應用實時熒光定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（real-time quantitative assay，qRT-PCR）及Western blot（WB）檢測肝癌細胞株MHCC-97L及

2、正常肝上皮細胞LO2中Talin-1 mRNA及蛋白的表達水平。使用病毒轉染MHCC-97L細胞制備穩(wěn)定轉染的Talin-1敲低MHCC-97L細胞株（sh-Talin-1 MHCC-97L）。使用細胞計數(shù)法分析比較MHCC-97L細胞和sh-Talin-1 MHCC-97L細胞的生長能力；使用細胞劃痕實驗和Transwell遷移實驗分析比較MHCC-97L細胞和sh-Talin-1 MHCC-97L細胞的轉移能力。使用人全基因芯片（4

3、0000個基因）分析 MHCC-97L細胞和sh-Talin-1 MHCC-97L細胞中差異表達的基因；使用GO富集分析芯片數(shù)據(jù)，分析Talin-1調控的生物學行為；使用Cytoscape v3.4.0制作Talin-1的調控網(wǎng)絡。使用GraphPad Prism5進行統(tǒng)計學分析。
　　結果： MHCC-97L細胞及LO2細胞中Talin-1均有表達，且Talin-1mRNA（P＜0.001）及蛋白（P＜0.001）在MHCC-9

4、7L細胞中的表達顯著高于其在LO2細胞中的表達水平。Talin-1 mRNA（P＜0.001）及蛋白（P＜0.001）在MHCC-97L細胞中的表達顯著高于其在sh-Talin-1 MHCC-97L細胞中的表達水平。進一步通過全基因芯片分析發(fā)現(xiàn)在這40000個基因中, Talin-1敲低后3099個基因表達發(fā)生改變，其中1924個基因表達上調，2175個基因表達下調。通過 GO富集分析發(fā)現(xiàn)Talin-1促進許多HCC進展相關的生物學行為

5、，包括離子轉運（相關基因：CAV3與KCNE3等），膜去極化（相關基因：CAV3與KCNE3等），細胞生長（相關基因：EDN1，IGFBP5，CYR61等）及細胞粘附（相關基因：MUC1，SLAMF7，WISP1等）。最后通過檢索已發(fā)表文章和數(shù)據(jù)庫并制作 Talin-1調控網(wǎng)絡，我們發(fā)現(xiàn)Talin-1能調控細胞周期蛋白（如Cyclin D1, BCL-2家族和p53網(wǎng)絡），EMT相關蛋白（如E-鈣黏蛋白，N-鈣黏蛋白 and vimen