紅景天聯(lián)合黨參對(duì)小鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:隨著經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展,我國已經(jīng)成為酒類消費(fèi)大國,而由此引發(fā)的一系列酒精性肝病已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。由于酒精性肝病的治療方法仍然有限,中草藥被認(rèn)為是重要的替代方法,開發(fā)具有保護(hù)酒精性肝損傷的中藥類保健食品,具有重要的社會(huì)意義。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)前期血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)確定紅景天和黨參配伍的最佳比例,通過正交試驗(yàn)優(yōu)選出紅景天和黨參提取液噴霧干燥的最佳工藝條件,并測(cè)定其噴霧干燥前后活性成分及抗氧化損失率。通過白酒誘導(dǎo)的小鼠急性酒精性肝損傷模型,比較

2、不同劑量的紅景天和黨參復(fù)方制劑保護(hù)肝臟的作用及其作用機(jī)制。為紅景天和黨參復(fù)方制劑保健功能的開發(fā)提供理論依據(jù)。
  方法:
  1.采用70%乙醇混合提取紅景天和黨參。通過正交試驗(yàn),優(yōu)選其噴霧干燥的最佳工藝條件。
  2.采用HPLC法測(cè)定噴霧干燥后紅景天和黨參復(fù)方制劑中紅景天苷和黨參炔苷的含量及計(jì)算損失率,通過對(duì)DPPH自由基清除能力計(jì)算抗氧化損失率。
  3.體內(nèi)實(shí)驗(yàn),取小鼠80只,隨機(jī)分空白組、模型組、陽性對(duì)

3、照組、紅景天組、黨參組、紅景天和黨參復(fù)方制劑低、中、高劑量組,每組10只。根據(jù)前期的血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定紅景天和黨參以1g·60kg-1(生藥)和1.5g·60kg-1(生藥)為人體每日最佳推薦劑量,以5倍、10倍和20倍為小鼠低、中、高劑量,即紅景天中劑量為0.167g·kg-1(生藥),黨參中劑量為0.25g·kg-1(生藥)。通過紅景天和黨參藥物提取液得率計(jì)算出,紅景天和黨參復(fù)方制劑以0.0895g·kg-1、0.

4、179g·kg-1、0.358g·kg-1(粉末)為小鼠低、中、高劑量。陽性藥物選擇凱西萊(50mg·kg-1)??瞻捉M和模型組灌胃蒸餾水(0.1mL·10g-1),其余給藥組灌胃相應(yīng)藥物(0.1mL·10g-1),每天1次,連續(xù)5天。末次給藥30min后,除空白組灌胃等量蒸餾水,其余組一次性灌胃56度紅星二鍋頭16mL·kg-1,禁食不禁水。禁食12h后稱重,摘眼球取血取上清液待測(cè),并根據(jù)試劑盒測(cè)定血清中AST和ALT水平。頸椎脫臼處

5、死小鼠后,迅速取出肝臟,記錄肝臟重量,計(jì)算肝臟系數(shù),計(jì)算公式:肝臟系數(shù)=肝臟重量(mg)/小鼠體重(g)。稱取適量肝組織,制備肝組織勻漿液,取上清液待測(cè)。并根據(jù)試劑盒測(cè)定肝勻漿中TG、GSH、SOD和MDA含量。
  結(jié)果:
  1.正交試驗(yàn)結(jié)果表明:紅景天和黨參提取液噴霧干燥最佳工藝條件:進(jìn)風(fēng)溫度160℃,提取液相對(duì)密度1.09,輔料添加量50%,進(jìn)行噴霧干燥,計(jì)算粉末收率為28.95%,含水量4.02%。
  2.

6、有效成分含量測(cè)定結(jié)果表明:噴霧干燥前紅景天苷含量為(3.400±0.015)mg·g-1,噴霧干燥后紅景天苷含量為(3.209±0.019)mg·g-1,損失率為5.56%;噴霧干燥前紅景天苷含量為(0.304±0.0016)mg·g-1,噴霧干燥后紅景天苷含量為(0.288±0.0016)mg·g-1,損失率為5.26%。
  3.DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:噴霧干燥前IC50值為(0.681±0.061)mg·mL-1,噴

7、霧干燥后IC50值為(0.718±0.022)mg·mL-1,抗氧化損失率為5.43%。
  4. HPLC方法學(xué)考察結(jié)果表明:考察的有效成分分別為紅景天苷和黨參炔苷,精密度RSD分別為1.43%和1.46%;穩(wěn)定性RSD分別為1.37%和1.61%.;重復(fù)性RSD分別為1.36%和1.36%;加樣回收率RSD分別為1.79%和1.77%。
  5.拆方實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:各組指標(biāo)與模型組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中復(fù)方制劑中劑

8、量組與黨參組相比,復(fù)方制劑中劑量組能顯著降低ALT水平(P<0.01);與紅景天組相比,復(fù)方制劑中劑量組能顯著降低MDA含量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
  6.最佳劑量篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:模型組各指標(biāo)與空白組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);除復(fù)方制劑低劑量組AST水平與模型組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,其余各給藥組指標(biāo)均與模型組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);與復(fù)方制劑低劑量組相比,復(fù)方制劑中劑量組能顯著升高SOD含量,差異有

9、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  7.肝臟系數(shù)結(jié)果表明:各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)論:
  1.紅景天和黨參提取液噴霧干燥最佳工藝條件為:進(jìn)風(fēng)溫度160℃,提取液相對(duì)密度1.09,輔料添加量50%。
  2.紅景天和黨參復(fù)方制劑中紅景天苷含量為(3.209±0.019)mg·g-1,黨參炔苷含量為(0.288±0.0016)mg·g-1。
  3.紅景天聯(lián)合黨參對(duì)小鼠急性酒精性肝損傷具有保護(hù)作用

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