1、隨著人民生活水平的提高，過(guò)量飲酒及酗酒現(xiàn)象日益增多。過(guò)度飲酒相關(guān)問(wèn)題是一個(gè)世界各國(guó)都極為關(guān)注的社會(huì)公共衛(wèi)生問(wèn)題。據(jù)統(tǒng)計(jì)10％-20％酗酒者有不同程度酒精性肝病。近年來(lái)酒精性肝病發(fā)病及死亡情況在我國(guó)呈迅速增長(zhǎng)趨勢(shì)。酒精中毒時(shí)β-內(nèi)啡肽(β-EP)釋放增加，谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)對(duì)反映肝損傷具有較好的敏感性和特異性，丙二醛(MDA)可反映肝臟氧化應(yīng)激的程度，P-選擇素(P-selectin)是介導(dǎo)細(xì)胞間相互作用和炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)。

2、葛根素(Puerarin.Pue)是葛根的主要有效成分之一，臨床用于治療心、腦血管病等疾病，療效良好。據(jù)記載，葛根素有解酒之功效，但其臨床應(yīng)用及基礎(chǔ)研究還很少。為此，我們對(duì)葛根之主要提取物——葛根素進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，觀察急性酒精中毒對(duì)大鼠谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、丙二醛、β-內(nèi)啡肽、P-選擇素及肝組織病理學(xué)的影響，以及葛根素對(duì)急性酒精性肝損傷的干預(yù)作用，為葛根素的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 材料與方法:1.動(dòng)物與藥物健康成年Wist

3、ar大鼠24只，雌雄對(duì)半，體重150-200g；無(wú)水酒精，將其稀釋為40％濃度，按8g/kg.d灌胃；葛根素注射液；β-EP試劑盒；GST試劑盒、MDA試劑盒；P-selectin試劑盒。 2.實(shí)驗(yàn)儀器：FJ-2008PSγ放射免疫計(jì)數(shù)儀，Beckman.DU640分光光度計(jì)，BIO-RADModel550酶標(biāo)儀。 3.分組及實(shí)驗(yàn)方法：將大鼠隨機(jī)分為3組，每組8只。A組(對(duì)照組)：生理鹽水腹腔注射(ip.)和灌胃(ig.

4、)；B組(模型組)：等量生理鹽水ip.，40％酒精8.0g/kg.d.ig.，連續(xù)5天；C組(葛根素組)：葛根素200mg/kg.d.ip.，相同劑量酒精ig.，連續(xù)5天；各組最后一次處理后取血，迅速留取肝組織。檢測(cè)血清GST、MDA、P-selectin，血漿β-EP及肝組織勻漿GST、MDA水平。肝組織于普通光學(xué)顯微鏡及電鏡下觀察病理改變。 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：有關(guān)測(cè)定數(shù)據(jù)以(x)±s表示，SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，t檢驗(yàn)

5、及方差分析檢驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)之間的差異性，P＜0.05差異有顯著性，P＜0.01差異有非常顯著性。 結(jié)果1.一般情況對(duì)照組大鼠鼠毛光澤，反應(yīng)敏捷，營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)良好；模型組大鼠毛色晦暗，委靡，略為瘦弱；葛根素組大鼠比模型組毛色略好、反應(yīng)較快、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)尚可。 2.葛根素對(duì)急性酒精中毒大鼠血清GST、MDA、P-selectin及血漿β-EP水平的影響 模型組大鼠血清GST、MDA、P-selectin及血漿β-EP水平明顯地高

6、于對(duì)照組(GST、β-EP：P＜0.01，MDA、P-selectin：P＜0.05)；葛根素組GST、MDA、β-EP、P-selectin水平較酒精中毒組顯著降低(P＜0.05)。 3.葛根素對(duì)急性酒精中毒大鼠肝組織勻漿GST、MDA水平影響模型組大鼠肝組織勻漿GST、MDA水平明顯地高于對(duì)照組(MDAP＜0.05；GSTP＜0.01)；葛根素組GST、MDA水平較模型組顯著降低(P＜0.05)。 4.葛根素對(duì)急性酒

7、精中毒大鼠肝組織病理的影響4.1光鏡改變對(duì)照組肝細(xì)胞及組織結(jié)構(gòu)基本正常。模型組肝小葉結(jié)構(gòu)不清，肝索紊亂，肝竇僵硬，肝細(xì)胞廣泛脂肪變性、濁腫并氣球樣變，可見(jiàn)局灶性壞死。葛根素組肝小葉結(jié)構(gòu)尚清，肝細(xì)胞索排列成放射狀，基本整齊，肝竇基本正常，肝細(xì)胞濁腫明顯減輕，可見(jiàn)少量脂滴。 4.2電鏡改變對(duì)照組肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常。模型組可見(jiàn)胞漿內(nèi)脂變，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，糖原明顯減少，線粒體增大畸形、嵴斷裂，細(xì)胞核電子密度增強(qiáng)，異染色質(zhì)呈團(tuán)塊狀集聚在核

8、的周邊，胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器明顯減少，出現(xiàn)空泡樣改變。葛根素組肝細(xì)胞有少許脂滴，少數(shù)線粒體腫脹，糖原略減少。 討論:短時(shí)期大量攝入酒精可引起急性酒精性肝損傷。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示急性酒精中毒使大鼠血清及肝組織GST、MDA升高，肝組織病理?yè)p傷，肝細(xì)胞濁腫、脂肪變性、壞死，纖維結(jié)締組織增生，考慮其損傷機(jī)制與酒精致肝臟氧化代謝的改變，產(chǎn)生大量自由基引起肝細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化所致?lián)p傷有關(guān)。予葛根素預(yù)處理后可抑制酒精中毒大鼠MDA、GST水平升高，肝組織細(xì)

9、胞濁腫、脂變明顯減輕，病理?yè)p傷顯著改善，提示葛根素有拮抗急性酒精中毒所致的氧化應(yīng)激，有保護(hù)肝組織細(xì)胞，改善肝功能的作用。本實(shí)驗(yàn)中模型組大鼠β-EP水平明顯升高，葛根素組β-EP水平較模型組顯著降低，考慮肝損傷可能與β-EP可明顯抑制肝細(xì)胞鳥(niǎo)氨酸脫羧酶活性，從而抑制肝內(nèi)蛋白質(zhì)合成有關(guān)，葛根素可通過(guò)抑制β-EP的釋放改善肝功能。P-selectin可介導(dǎo)活化內(nèi)皮細(xì)胞、血小板與中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞相互作用，與免疫損傷、炎癥等密切相關(guān)，我們的研