白藜蘆醇延緩小鼠卵母細(xì)胞體外老化的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探討白藜蘆醇對(duì)小鼠卵母細(xì)胞體外老化的影響。
  方法:使用PMSG和HCG對(duì)小鼠促排后收集體內(nèi)成熟的MII期卵母細(xì)胞,隨機(jī)分入新鮮對(duì)照組及老化組或不同濃度白藜蘆醇處理組。采用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)體外老化前后卵母細(xì)胞紡錘體、染色體形態(tài)、微絲帽表達(dá)及線粒體分布情況、測(cè)定ROS水平并進(jìn)行比較;添加不同濃度白藜蘆醇在體外老化過程中處理卵母細(xì)胞,比較白藜蘆醇處理后ROS水平的改變,并分析其對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體、染色體、微絲帽及線粒體的影響。<

2、br>  結(jié)果:
 ?。?)老化組的卵母細(xì)胞紡錘體異常形態(tài)率(61.34% vs19.80%,P<0.05)及染色體異常形態(tài)率(58.76% vs27.41%,P<0.05)均顯著高于未老化的新鮮對(duì)照組,微絲帽表達(dá)率則明顯低于新鮮對(duì)照組(26.58% vs87.88%,P<0.05);線粒體在新鮮對(duì)照組中以均勻型分布為主(68.84%),其余為團(tuán)簇樣分布(16.74%)及極性分布(14.42%),老化組線粒體團(tuán)簇樣分布比例升高至6

3、8.16%,均勻分布及極性分布比例則分別降至27.86%及3.98%,兩組分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
 ?。?)老化組ROS水平顯著高于新鮮對(duì)照組(P<0.05),分別使用2μM、5μM、10μM、25μM白藜蘆醇處理后卵母細(xì)胞的ROS水平均顯著低于老化組(P<0.05)。(3)在2μM、5μM、10μM、25μM處理組中紡錘體異常率分別為21.21%、37.06%、40.31%、40.00%,全部低于同樣條件未添加白

4、藜蘆醇的老化組(61.34%,P<0.05);染色體異常率為34.85%、37.56%、43.37%、46.49%,同樣低于老化組(58.76%, P<0.05),而微絲帽表達(dá)率分別為80.25%、76.36%、77.38%、50.00%,均顯著高于老化組(26.58%,P<0.05);2μM、5μM、10μM、25μM處理組卵母細(xì)胞線粒體團(tuán)簇樣分布比例分別為44.84%、46.33%、52.15%、52.07%,均低于老化組(68.1

5、6%),均勻分布的比例(51.57%、50.00%、43.06%、43.32%)則高于老化組(27.86%),而線粒體呈極性分布的卵母細(xì)胞比例與老化組相似,各組線粒體分布模式與老化組均有顯著差異(P<0.05)。
  結(jié)論:(1)體外老化后卵母細(xì)胞發(fā)生了損傷性改變;(2)體外老化后卵母細(xì)胞ROS水平升高,提示氧化應(yīng)激與卵子老化性改變相關(guān);(3)白藜蘆醇能夠減緩老化卵母細(xì)胞ROS水平的上升;(4)白藜蘆醇處理能夠緩解卵母細(xì)胞老化時(shí)的

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