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![實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在侵襲性真菌感染診斷中的價(jià)值.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/0165b36e-7d76-4164-b1b8-437b220b9735/0165b36e-7d76-4164-b1b8-437b220b97351.gif)
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1、目的:本研究將實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Real-time Flurescent Quantitive Polymerase Chain Reaction,RTFQ-PCR)應(yīng)用于侵襲性真菌感染(Invasive fungal infection IFI)的早期診斷,旨在評(píng)價(jià)RTFQ-PCR技術(shù)在IFI早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值,為早期診斷與治療IFI提供依據(jù)。
方法:1、采集寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院及心腦血管病醫(yī)院ICU科2015年5月至
2、2016年3月IFI高?;颊?02份血清,同時(shí)收集其相關(guān)臨床資料。
2、送檢血培養(yǎng)、G試驗(yàn)。
3、RTFQ-PCR檢測(cè):①提取白色念珠菌DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增出目的基因片段并回收,然后倍比稀釋,分別計(jì)算出拷貝數(shù),最后經(jīng)RTFQ-PCR檢測(cè),由軟件繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。②提取IFI高?;颊哐逯械腄NA,進(jìn)行RTFQ-PCR檢測(cè),收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
4、根據(jù)“重癥患者IFI的診斷和治療指南(2007年)”制定的診斷標(biāo)準(zhǔn),
3、將納入的研究對(duì)象分為:確診IFI、臨床診斷IFI、擬診IFI及非IFI。將“2007年指南”作為金標(biāo)準(zhǔn),以確診和臨床診斷病例作為感染組,非IFI病例作為非感染組,將感染組和非感染組分別作為陽性對(duì)照病例和陰性對(duì)照病例,計(jì)算RTFQ-PCR和G試驗(yàn)的敏感度(Sensitivity Se)、特異度(Specificity Sp)、陽性預(yù)測(cè)值(Positive predictive value PPV)、陰性預(yù)測(cè)值(Negative predi
4、ctive value NPV),分析評(píng)價(jià)RTFQ-PCR在IFI早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
5、以血培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn),將血培養(yǎng)陽性作為陽性對(duì)照病例,血培養(yǎng)陰性做為陰性對(duì)照病例,計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值。
結(jié)果:1、本次研究收集了102份標(biāo)本,最終共納入99份標(biāo)本做為研究對(duì)象,其中,確診IFI病例2例,臨床診斷IFI病例20例,擬診IFI病例28例,非IFI病例49例。以“2007年指南”
5、作為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度為50%,特異度為96%,陽性預(yù)測(cè)值為82%,陰性預(yù)測(cè)值為84%;G試驗(yàn)的敏感度為54%,特異性為92%,陽性預(yù)測(cè)值為76%,陰性預(yù)測(cè)值為80%;聯(lián)合應(yīng)用RTFQ-PCR和G試驗(yàn)的敏感度為78%,特異度為88%,陽性預(yù)測(cè)值為70%,陰性預(yù)測(cè)值為91%。
2、以血培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算RTFQ-PCR的敏感度為100%,特異度為88%,陽性預(yù)測(cè)值為15%,陰性預(yù)測(cè)值為100%。
結(jié)論
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