1、在血液系統(tǒng)中，轉(zhuǎn)錄因子Tcfec主要在造血干細胞(Hematopoieticstemcells，HSCs)和多能祖細胞(Multipotentprogenitors,MPPs)中高表達。目前為止，關(guān)于Tcfec在HSCs的功能影響及機制尚不清楚。
　　目的：
　　1、證實Tcfec在HSCs和MPPs中的表達水平。
　　2、構(gòu)建Tcfec逆轉(zhuǎn)錄病毒過表達體系。
　　3、通過體內(nèi)、體外實驗研究過表達Tcfec對HS

2、Cs的功能影響。
　　方法：
　　1、分選高純度HSCs和MPPs細胞群，MySeq測序儀進行RNA-Seq測序并獲得原始測序數(shù)據(jù)(Rawdata)。利用生物信息學(xué)技術(shù)深入分析，獲得了HSCs及MPPs細胞的轉(zhuǎn)錄因子表達差異譜。
　　2、q-PCR分析Tcfec在HSCs和MPPs中的表達水平。
　　3、利用逆轉(zhuǎn)錄病毒過表達系統(tǒng)，將小鼠Tcfec基因的開放閱讀框（Openreadingframe,ORF）構(gòu)建到過

3、表達載體，并用細胞轉(zhuǎn)染、熒光定量PCR方法驗證過表達體系的構(gòu)建。
　　4、將流式分選的陽性細胞（感染過表達病毒載體的小鼠胎肝Lin-細胞）移植到經(jīng)致死劑量輻照處理的受體鼠，構(gòu)建體內(nèi)移植動物模型。
　　5、流式細胞儀檢測移植細胞的陽性率和對骨髓造血譜系分化影響的相關(guān)檢測。
　　6、流式細胞儀檢測Tcfec對HSPC細胞周期的影響。
　　7、利用體外克隆形成實驗，研究Tcfec對體外克隆形成的影響效果。
　　結(jié)

4、果：
　　1、Tcfec在HSCs相對MPPs高表達。
　　2、成功構(gòu)建Tcfec過表達載體。
　　3、移植16周后，Tcfec組中陽性細胞比例占有優(yōu)勢，血細胞各譜系分化完全正常。
　　4、過表達Tcfec的HSCs及MPPs細胞庫總體數(shù)量增加，但對CMP、GMP、MEP祖細胞庫無影響。
　　5、Tcfec對于HSPC的細胞周期沒有影響。
　　6、Tcfec組體外形成的混合細胞型克?。℅EMM）較對照