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文檔簡介
1、目的:免疫逃逸是干細胞的一個重要特征,它可以逃避宿主免疫系統(tǒng)的殺傷,與宿主形成嵌合體。本研究從細胞毒性淋巴細胞(CTL)、自然殺傷細胞(NK細胞)及免疫耐受分子HLA-G等三個方面,對造血干細胞的免疫逃逸機制進行初步探討,并對來源于外周血、骨髓和臍帶血的三種常用造血干細胞的免疫逃逸能力進行比較,找到最適合用于移植的造血干細胞類型。 方法:(1)用免疫磁珠法分別從成人外周血、成人骨髓及臍帶血中分離外周血造血干細胞(PBSC)、骨髓
2、造血干細胞(BMSC)及臍帶血造血干細胞(CBSC);(2)分別用免疫磁珠法及流式細胞分選法從成人外周血中分離CTL及NK細胞;(3)以CTL、外周血NK細胞和NK-92細胞系為效應(yīng)細胞,并分別以PBSC、BMSC、CBSC為靶細胞,以去除了造血干細胞的外周血單個核細胞為對照靶細胞,用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法分析效應(yīng)細胞對靶細胞的殺傷率;(4)以CTL和外周血NK細胞為效應(yīng)細胞,并分別以PBSC、BMSC、CBSC為靶細胞,用克隆增殖
3、實驗分析效應(yīng)細胞對靶細胞增殖能力的抑制率;(5)用流式細胞術(shù)分析PBSC、BMSC、CBSC表面HLA-I類分子、HLA-Ⅱ類分子、NKp30配體(NKp30L)、NKp46配體(NKp46L)及HLA-G的表達情況。 結(jié)論:(1)三種造血干細胞對CTL和NK細胞都具有一定程度的免疫逃逸能力,其中對CTL的免疫逃逸能力沒有顯著性差異,而對NK細胞的免疫逃逸能力由高到低依次為:CBSC,BMSC,PBSC。(2)NKp30L、NKp
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