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文檔簡介
1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文造血干細(xì)胞移植治療腦梗死的實(shí)驗(yàn)研究姓名:馬洪穎申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師:李永秋20080301中文摘要造血干細(xì)胞移植治療腦梗死的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的:缺血性腦血管病是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,具有較高的致殘率和致死率。除了超早期的溶栓治療和康復(fù)外沒有任何治療措施能夠證明對患者有益。因此,腦缺血患者受損神經(jīng)功能的修復(fù)成為研究的重點(diǎn)。目前認(rèn)為最有前景的方法是細(xì)胞替代治療。造血干細(xì)胞(hematopoieti
2、cstemcells,HSCs)可塑性使臨床HSCs移植治療腦梗死成為可能。本研究通過觀察移植細(xì)胞存活、遷移、分化情況,以及移植前后神經(jīng)功能缺損評分、梗死體積的變化,驗(yàn)證HSCs能否分化為神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞,重建神經(jīng)環(huán)路及微循環(huán)。并探討神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactorNGF)對移植HSCs的存活、分化以及神經(jīng)功能改善的影響。同時(shí)比較HSCs內(nèi)源性動員和外源性移植的治療效果,尋找腦梗死治療更有效方法。方法
3、l通過皮下注射重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhGCSF)束U激骨髓干細(xì)胞入血,經(jīng)密度梯度離心方法分離HSCs。細(xì)胞免疫組化檢測HSCs表面特異性抗原CD34。利用(5一溴脫氧尿嘧啶)Brdu進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記。選取280~3209雄性SD大鼠,根據(jù)改良后的Longa線栓法建立大鼠大腦中動脈腦栓塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,模型制作成功后7天,隨機(jī)分為五組:HSCs組(A組)、HSCsNGF組(B
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