1、黃嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase，XOD）是體內(nèi)核酸代謝中重要的酶，能催化黃嘌呤和次黃嘌呤的氧化生成尿酸，同時(shí)產(chǎn)生過(guò)氧化物自由基。尿酸濃度過(guò)高將導(dǎo)致高尿酸血癥，高尿酸血癥是引起痛風(fēng)的重要生化基礎(chǔ)。通過(guò)抑制XOD的活性降低體內(nèi)尿酸的含量從而防治痛風(fēng)。
　　據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，草木樨屬植物白花草木樨（Melilotus Albus）和柑橘屬藥食同源藥材枳實(shí)（Aurantii Fructus Immaturus）、青皮（Citri

2、 Reticulatae Pericarpium Viride）、陳皮（Citri Reticulatae Pericarpium）、橘紅（Citri Exocarpium Rubrum）、佛手（Fructus Citri Sarcodactylis）、香櫞（Citri Fructus）富含黃酮類化合物，黃酮類化合物具有較強(qiáng)的生物活性，包括對(duì)XOD的抑制活性。本研究課題期望通過(guò)建立白花草木樨與柑橘屬藥材中不同組分的指紋圖譜結(jié)合體外黃嘌呤

3、氧化酶抑制活性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行綜合分析，分離鑒定出抑制黃嘌呤氧化酶的活性化合物并明確其物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制。
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)優(yōu)化不同色譜柱、流動(dòng)相組成和檢測(cè)波長(zhǎng)等色譜條件，建立了白花草木樨和柑橘屬藥材提取物HPLC分析方法。以黃嘌呤為底物，通過(guò)HPLC法測(cè)定尿酸生成量從而評(píng)價(jià)化合物對(duì)黃嘌呤氧化酶抑制活性強(qiáng)弱，利用活性篩選模型測(cè)定各不同組分對(duì)XOD抑制作用。結(jié)果顯示，白花草木樨除水組分外，各萃取組分均有一定的抑制活性，其中乙酸乙酯萃取組分為有

4、效組分（200μg/mL濃度下抑制率為66.93±1.52％）。柑橘屬不同藥材70%乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇不同溶劑提取物的抑制活性以枳實(shí)、青皮乙酸乙酯提取物的抑制活性較高（200μg/mL濃度下枳實(shí)、青皮的抑制率分別為60.70±0.74%、50.15±0.44%）。
　　綜合運(yùn)用十八烷基鍵合硅膠柱色譜（ODS）和制備液相色譜（Preparative HPLC）等技術(shù)從白花草木樨的乙酸乙酯萃取組分中分離得到2個(gè)活性化合物，

5、綜合運(yùn)用1H-NMR、13C-NMR、MS等波譜數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)分別為芹菜素（化合物1）和苜蓿素（化合物2）。從枳實(shí)乙酸乙酯提取物中分離得到7個(gè)化合物，其中包括5個(gè)黃烷酮類化合物，其結(jié)構(gòu)分別鑒定為：柚皮苷（化合物3）），橙皮苷（化合物4），新橙皮苷（化合物5），柚皮素（化合物6），橙皮素（化合物7）；兩個(gè)多甲氧基黃酮類，其結(jié)構(gòu)分別鑒定為川陳皮素（化合物8）和桔皮素（化合物9）。
　　單體化合物黃嘌呤氧化酶體外活性和酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)