1、目的：氧化性低密度脂蛋白（oxygenized low density lipoprotein，ox-LDL）復(fù)制大鼠血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的增殖模型，探討齊墩果酸（oleanolic acid，OA）對VSMCs增殖的抑制作用，并從UCP2/FGF-2/p53/TSP-1信號通路方面研究其作用機制。
　　方法：通過乳酸脫氫酶細胞毒性方法篩選出OA的毒性濃度，細胞計數(shù)

2、方法（cell counting kit-8，CCK-8）篩選出ox-LDL的造模濃度以及OA的給藥濃度。在模型組的基礎(chǔ)上分別加入UCP2抑制劑京尼平、轉(zhuǎn)染FGF-2 siRNA、p53激活劑PRIMA-1研究UCP2/FGF-2/p53/TSP-1通路的級聯(lián)關(guān)系。將實驗分為5組，分別為正常組、模型組、OA低濃度組、OA中濃度組、OA高濃度組，提取各組RNA并檢測其純度及濃度，RT-PCR觀察各組UCP2、FGF-2、p53、TSP-1

3、 mRNA的表達情況。提取各組蛋白并用BCA法檢測蛋白濃度，Western-Blot測定各組UCP2、FGF-2、p53、TSP-1的蛋白表達情況。在給藥的基礎(chǔ)上加入京尼平，研究OA是否是通過該通路發(fā)揮作用的。
　　結(jié)果：通過乳酸脫氫酶細胞毒性檢測方法篩選出的OA毒性濃度為40μM，通過CCK-8檢測，50μg/ml ox-LDL能獲得最大細胞增殖率，由此作為造模濃度。在模型組中加入UCP2抑制劑京尼平后與原模型組比較發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GF

4、-2表達有所降低，p53、TSP-1有所升高，表明UCP2是它們的上游因子，在模型組中加入FGF-2 siRNA后與原模型組比較發(fā)現(xiàn)，UCP2無明顯變化，而p53和TSP-1均有所升高，表明FGF-2為UCP2下游基因，是p53、TSP-1的上游基因，在模型組中加入p53激活劑PRIMA-1后與原模型組比較發(fā)現(xiàn)，UCP2、FGF-2無明顯變化，TSP-1表達升高，說明p53是UCP2、FGF-2下游基因，是TSP-1上游基因。mRNA結(jié)

5、果顯示，模型組UCP2、FGF-2表達水平升高，而p53、TSP-1表達水平降低，藥物OA能改善這一現(xiàn)狀，Western Blot結(jié)果與此一致。此外，在給藥30μM基礎(chǔ)上加入京尼平后發(fā)現(xiàn)，與原來UCP2抑制劑組和OA組相比，各蛋白的表達沒有發(fā)生顯著性變化。
　　結(jié)論：50μg/ml ox-LDL能夠復(fù)制VSMCs增殖模型，OA的毒性濃度為40μM。UCP2/FGF-2/p53/TSP-1存在級聯(lián)關(guān)系，OA能夠抑制VSMCs的異常增