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文檔簡介
1、目的:
1.觀察術(shù)后疲勞綜合征(Postoperative Fatigue Syndrome,POFS)的大鼠海馬內(nèi)炎癥因子,腹腔炎癥細(xì)胞因子以及外周血中炎癥因子的動(dòng)態(tài)變化
2.觀察在術(shù)后疲勞綜合征的大鼠體內(nèi)阻斷迷走神經(jīng)后,海馬內(nèi)炎癥因子,腹腔內(nèi)炎癥因子及外周血中炎癥因子所發(fā)生的變化,以探討迷走神經(jīng)在術(shù)后疲勞綜合征大鼠模型中對(duì)炎癥因子變化的影響。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:SPF級(jí)SD成年雄性大鼠,體
2、重220-250g,購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。
2.方法及檢測指標(biāo):將成年雄性SD大鼠稱重編號(hào)隨機(jī)分為對(duì)照組(C組),POFS模型組(M組),術(shù)后疲勞模型基礎(chǔ)上的迷走神經(jīng)切除組(V組);每組再按時(shí)間點(diǎn),分為術(shù)后第1天和術(shù)后第3天組兩個(gè)亞組。然后于術(shù)后對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn),進(jìn)行曠場試驗(yàn)后,抽取大鼠血液制備血清,同時(shí)提取腹腔灌洗液和大鼠大腦海馬體,通過Real-time PCR檢測炎癥因子IL-6,IL-1β,TNF-α的mRNA表
3、達(dá);ELISA檢測血清和腹腔灌洗液中炎癥因子IL-6的分泌水平;電鏡下觀察各組大鼠海馬體CA1區(qū)超微結(jié)構(gòu)變化。
結(jié)果:
1.曠場試驗(yàn):與對(duì)照組C組比較,在術(shù)后第1天和第3天,M組的運(yùn)動(dòng)得分顯著降低(P<0.05);同時(shí),M組的外周與中央格子比、中央起始格子停留時(shí)間以及休息時(shí)間顯著增加(P<0.05)。與M組相比,在術(shù)后第1天和第3天,V組的運(yùn)動(dòng)得分顯著降低(P<0.05),而外周與中央格子比、中央起始格子停留時(shí)間以及
4、休息時(shí)間明顯延長(P<0.01)。此外,與M組相比,在術(shù)后第1天,V組的中央起始格子停留時(shí)間,外周與中央格子比顯著增加(P<0.05)
2.Real-time PCR:與對(duì)照組比較,術(shù)后第1天和第3天,大鼠海馬內(nèi)各項(xiàng)炎癥因子mRNA表達(dá)均升高(p<0.05);V組與M組比較,術(shù)后第1天和第3天,大鼠海馬內(nèi)各項(xiàng)炎癥因子mRNA表達(dá)均升高(p<0.05)。
3.ELISA:血清和腹腔灌洗液中的炎癥因子IL-6的檢測結(jié)果為
5、:
術(shù)后第1天,對(duì)照組、模型組和迷切組的血清中的IL-6分泌水平分別為65.85±10.59pg/mL,85.36±10.35pg/mL和89.65±11.25pg/mL,術(shù)后第3天,對(duì)照組、模型組和迷切組的血清中的IL-6分泌水平分別為56.73±14.38pg/mL,88.96±11.59pg/mL和96.86±14.57pg/mL。
術(shù)后第1天,對(duì)照組、模型組和迷切組的腹腔灌洗液中IL-6分泌水平分別為70.5
6、5±3.59pg/mL、75.18±11.24pg/mL和75.29±13.26pg/mL。術(shù)后第3天,對(duì)照組、模型組和迷切組的腹腔灌洗液中的IL-6分泌水平分別為69.35±4.52pg/mL、79.58±13.27pg/mL和195.26±11.68pg/mL。
4.電鏡:電鏡下觀察三組大鼠海馬神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)。模型組海馬神經(jīng)元在術(shù)后呈退化狀態(tài),核膜不光滑,呈波浪形狀,染色質(zhì)在核膜附近聚集。對(duì)照組海馬神經(jīng)元細(xì)胞核圓,里面的
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