1、放射治療是乳腺癌治療的重要手段之一，它不僅明顯提高了局部腫瘤控制率，而且提高了患者的遠期生存率。但是由于一部分乳腺癌細胞具有輻射抗性，限制了放射治療的療效，從而導致腫瘤局部復發(fā)和轉移。Hippo通路在果蠅和哺乳動物中對器官的大小和腫瘤的生長發(fā)揮關鍵作用。該通路的下游效應因子是YAP(Yes-associated protein，果蠅中的同源物是Yki)，其作為輔激活因子，與轉錄因子TEADs結合調控Hippo通路下游靶基因的表達，從而影

2、響腫瘤細胞的增殖、分化，腫瘤大小及預后。本研究重點深入系統(tǒng)研究了Hippo-YAP信號通路降低乳腺癌細胞輻射敏感性的作用及其分子機制。主要結果和發(fā)現如下:
　　第一部分:YAP蛋白對乳腺癌細胞放射增敏作用
　　為了探討YAP對乳腺癌細胞MDA-MB-231轉移和放射敏感性的影響，利用pCMV-YAP，si-RNA轉染法將YAP pCMV質粒和RNA干擾片段轉入MDA-MB-231細胞，Western blot法檢測YAP、B

3、CL-2蛋白表達水平，transwell法和細胞劃痕法檢測細胞轉移能力，集落形成法檢測細胞存活分數。結果表明，成功構建了YAP低表達的MDA-MB-231細胞株;YAP低表達明顯抑制細胞的轉移;細胞受γ線照射后，YAP低表達使細胞放射敏感性增強，凋亡細胞比例增多，同時BCL-2表達明顯降低。提示YAP低表達可明顯抑制細胞轉移;YAP低表達使細胞輻射敏感性增加很可能與下調BCL-2蛋白水平，促進凋亡有關。
　　第二部分:電離輻射對乳

4、腺癌細胞YAP蛋白及其磷酸化蛋白的影響
　　乳腺癌細胞MCF-7，MDA-MB-231細胞系作為研究對象。兩組細胞經過2、4、6、8和10Gy劑量γ射線照射后，細胞活力均有下降。兩組細胞相比較，MCF-7細胞比MDA-MB-231細胞活力下降的幅度更大，故MCF-7對電離輻射更敏感;兩組細胞在0、2、4、6Gy照射24h后，YAP蛋白表達含量變化不明顯，但是磷酸化的YAP(p-YAP)蛋白在照射劑量≥4Gy時有不同程度的升高。給予