1、本文從以下幾方面進行論述：
　　第一部分 大鼠ADSCs的分離、培養(yǎng)及多向分化潛能研究
　　目的：
　　研究培養(yǎng)、分離、純化以及鑒定ADSCs所使用的實驗方法，進而使它本身的生物學(xué)特點、表面抗原特點等得以明確，同時確定它本身在成骨、成脂肪方面所具有的潛能。這樣就可以確定ADSCs本身所具有的定向分化能力，進而為將其應(yīng)用于細胞治療POP提供可靠的理論依據(jù)。
　　方法：
　　在培養(yǎng)大鼠ADSCs細胞時，主要采用

2、酶消化法。在觀察ADSCs細胞結(jié)構(gòu)時，需要借助倒置顯微鏡來完成。在研究此種細胞的生存特點時，需要使用MTT進行檢測，并應(yīng)用流式細胞計數(shù)確定抗原表達水平;借助將ADSCs向成骨、成脂細胞定向誘導(dǎo)分化，進而研究此種細胞的分化水平。
　　結(jié)果：
　　通過觀察可以發(fā)現(xiàn)，體外培養(yǎng)所得到的ADSCs增殖速度較快，其大都為纖維狀細胞。細胞形態(tài)分布較為均勻，以多角形與長梭形為主。這樣在傳代的過程中，潛伏期持續(xù)時間為一至兩天，對數(shù)生長期在三至

3、五天，一周后即可進入“s”形生長期。通過第三代細胞流式鑒定后，發(fā)現(xiàn)CD29、CD44、CD105表現(xiàn)出陽性，對于CD34、CD45表現(xiàn)出陰性，持其為間充質(zhì)來源干細胞。ADSCs向成骨細胞誘導(dǎo)28d后茜素紅染色陽性;在細胞誘導(dǎo)實驗中發(fā)現(xiàn)，細胞內(nèi)存在脂滴。應(yīng)用油紅“O”對其進行染色，發(fā)現(xiàn)細胞呈橘紅色。
　　結(jié)論：
　　ADSCs取材方便，易于分離培養(yǎng)，體外培養(yǎng)增殖穩(wěn)定，能夠向成骨、成脂細胞誘導(dǎo)分化，具有定向分化的能力，能夠作為種

4、子細胞治療PFD.。
　　第二部分 17β-雌二醇對大鼠脂肪源性干細胞增殖及膠原蛋白合成的影響
　　目的：
　　確定應(yīng)用雌激素后大鼠ADSCs增殖、Ⅰ和Ⅲ型膠原蛋白mRNA表達過程以及蛋白合成的影響，這樣就可以將雌激素與ADSCs同步使用后進行治療，從而為POP提供一定的參考。
　　方法：
　　1、在實驗設(shè)計的過程中，實驗組設(shè)定了不同濃度的17β-雌二醇（濃度依次為10-7、10-8、10-9、10-10、

5、10-11M。對照組培養(yǎng)基中，不注入17β-雌二醇。所使用的細胞為3代大鼠ADSCs1周。在檢測細胞增殖水平時，應(yīng)用MTT比色法。
　　2.分別使用不同濃度實驗組以及對照組所設(shè)定的培養(yǎng)基培養(yǎng)第三代大鼠DSCs，時間為七天、十四天、二十一天。應(yīng)用Western blot技術(shù)確定不同類型膠原蛋白量的表達變化情況。
　　結(jié)果：
　　1.MTT法檢測結(jié)果:不同實驗組與對照組細胞在生長過程中均呈現(xiàn)出“S”型特點，實驗組大鼠在第三