1、研究目的：
　　腦出血(ICH)是具有高發(fā)病率和高死亡率的卒中類型，給家庭和社會帶來了沉重的經濟負擔。出血后腦水腫可以加重腦損傷是影響患者預后的主要因素。除行頭CT或MRI掃描外，目前尚缺乏無創(chuàng)而有效的監(jiān)測腦水腫變化的手段。近年，隨著循環(huán)中微小RNA(miRNAs)發(fā)現(xiàn)，越來越多的證據(jù)顯示其作為包括腦卒中在內多種疾病的生物標志物的有效性。miRNAs是一類長度為19-22核苷酸(nt)的內源性的非編碼單鏈小分子RNA，它通過與靶m

2、RNA3'UTR區(qū)完全或部分互補結合，參與蛋白表達的調節(jié)，在神經系統(tǒng)分化、發(fā)育以及神經系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展等過程中發(fā)揮重要的作用。我們對于其在腦出血發(fā)生發(fā)展中的作用還了解甚少，國內外鮮有相關研究。基于這種現(xiàn)狀，本研究對腦出血水腫期患者應用芯片雜交的方法檢測其外周血特異性miRNAs表達譜，以發(fā)現(xiàn)特異性表達的miRNAs，通過生物信息學軟件預測部分特異性表達的miRNAs可能的靶基因，挑選出預測靶基因與腦水腫相關的miRNAs并應用實時熒

3、光定量PCR(qRT-PCR)對其進行進一步驗證。在此基礎上，分析選擇的miRNAs與腦水腫之間是否具有相關性，以期望發(fā)現(xiàn)外周血中可預測腦水腫的特異性miRNAs類生物標記物，闡明腦出血后水腫可能的分子機制，從而為腦出血后灶周水腫的監(jiān)測和治療提供理論依據(jù)。
　　研究方法：
　　1、本研究收集了8例基底節(jié)區(qū)高血壓性腦出血患者的血清，其中男性4例，女性4例，年齡57.37±9.67歲間，彼此無親緣關系;收集了4例年齡、性別匹配的

4、正常對照人群的血清，其中男性2例，女性2例，年齡60.75±7.69歲間，彼此無親緣關系。提取血清中總RNA，經質控合格后利用miRNA微陣列芯片技術對腦出血患者與正常對照之間差異表達的miRNAs進行篩選。篩選差異表達的miRNAs的標準為:上調的Fold change值＞1.5，P＜0.05;下調的Fold change值＜0.6，P＜0.05。
　　2、分別應用miRecords數(shù)據(jù)庫和靶基因預測軟件，預測部分差異表達的mi

5、RNAs的靶基因、分析靶基因參與的生物學功能，探討miRNAs與腦水腫相關的作用通路。
　　3、進一步擴大樣本量，采用RT-PCR方法對miR-126、miR-146a、miR-let-7a及miR-26a在腦出血、對照組的表達水平進行檢測，其中包括27例ICH患者、11例健康對照。最后，應用Spearman法分析其與腦出血后第1天及3-4天的腦水腫程度的相關性。
　　研究結果：
　　1、miRNA芯片檢測結果表明存在

6、腦出血特異性的miRNA表達譜;共篩選出65個差異表達的miRNA，其中64個miRNA下調，1個miRNA上調。
　　2、靶基因預測結果:利用生物信息學方法對選擇的miR-126、miR-146a、miR-let-7a及miR-26a進行靶基因預測，涉及與腦水腫相關的靶基因有VCAM1，SPRED1，PIK3R2，SMAD4，TRAF6，CFH，IRAK-1，IL-6，IL-8等。差異表達的miRNA靶基因的生物學功能包括加重炎

7、癥反應、促進白細胞活化(miR-126，miR-146a)，參與氧化應激(miR-146a)，凋亡(miR-let-7a)及平滑肌細胞增殖分化(miR-26a)等。
　　3、擴大樣本量，qRT-PCR法證實miR-126、miR-146a、miR-let-7a及miR-26a在腦出血組中均下調，與對照組相比相對表達量分別為0.56、0.52、0.50、0.51，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。通過上述miRNAs與腦水腫的相關性

8、分析發(fā)現(xiàn)miR-126與腦出血發(fā)病當天及3-4天后腦水腫程度負相關（r=-0.552，P=0.003;r=-0.714，P＜0.001），而miR-146a、miR-let-7a及miR-26a則與腦水腫沒有相關性。
　　研究結論：
　　1、建立了腦出血患者和健康對照者之間血清miRNA的差異表達譜。
　　2、生物信息學分析顯示miR-126、miR-146a、miR-let-7a及miR-26a可能通過調控其靶基因的