1、目的:變應(yīng)性鼻炎(AR)發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，眾多細(xì)胞及細(xì)胞因子參與其發(fā)病過程，很多學(xué)者認(rèn)為與Th1/Th2細(xì)胞失衡機(jī)制有關(guān)，但該學(xué)說仍有其不足的方面。近年研究發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、輔助性T細(xì)胞17(Th17)及相關(guān)細(xì)胞因子IL-17與AR的發(fā)生密切相關(guān)，Treg/Th17細(xì)胞失衡學(xué)說日益受到重視，這可能是對Th1/Th2學(xué)說的重要補(bǔ)充，對于AR發(fā)病機(jī)制的研究有著重要意義。且隨著IL-35的發(fā)現(xiàn)及研究的深入，學(xué)者們逐漸認(rèn)識(shí)到IL-35在

2、免疫應(yīng)答中發(fā)揮的重要作用。IL-35作為一種抑制性細(xì)胞因子，它可以對多個(gè)T細(xì)胞亞群的分化及功能產(chǎn)生影響，可能對維持Treg/Th17細(xì)胞平衡有著重要意義。已有研究證明IL-35數(shù)量及功能的缺失參與了多種疾病的發(fā)生發(fā)展。然而目前IL-35在AR中的研究仍相對不足，我們擬通過本實(shí)驗(yàn)檢測AR患者外周血中IL-35，IL-17，Treg的表達(dá)水平，研究IL-35、IL-17及Treg在AR發(fā)病機(jī)制中的作用，探討IL-35對于Treg/Th17細(xì)

3、胞平衡的調(diào)控作用及其在AR免疫治療中可能存在的價(jià)值。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選取了就診于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院耳鼻喉科門診并確診為變應(yīng)性鼻炎的患者30例為AR組，于我院體檢科檢查的健康體檢者20例為對照組，分別符合各組入組標(biāo)準(zhǔn)。采集受試者外周靜脈血4ml，按要求離心，取上層血清分裝兩管，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)雙抗體夾心法對外周血中IL-35及IL-17的表達(dá)水平進(jìn)行檢測，根據(jù)實(shí)驗(yàn)所測OD值從而計(jì)算出樣本待測指標(biāo)濃度值。同期

4、采集受試者外周血2ml，采用流式細(xì)胞術(shù)對CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞表達(dá)水平進(jìn)行檢測，結(jié)果以CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率表示。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均屬于計(jì)量資料，數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)符合正態(tài)分布，AR組與對照組相比較，采用兩個(gè)獨(dú)立樣本的T檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)檢驗(yàn)，所有統(tǒng)計(jì)均采用雙側(cè)概率檢驗(yàn)，α=0.05，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義。
　　結(jié)果:1AR組與對照組血清IL-35的表達(dá)水平相比較，AR組中IL-35的表達(dá)水平為54.127±8.138 pg/mL，對照組中IL-35的表達(dá)水平為71.622±6.227 pg/mL，AR組IL-35的表達(dá)水平顯著低于對照組，(t=-8.145，p＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2 AR組與對照組血清IL-17的表達(dá)水平相比較，AR組中IL-17的表達(dá)水平為422.267±55.140 pg/mL，對

6、照組中IL-17的表達(dá)水平為261.103±17.070 pg/mL，AR組IL-17的表達(dá)水平顯著高于對照組，(t=14.969，p＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3 AR組患者血清中IL-35與IL-17表達(dá)水平呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，(r=-0.773，p＜0.01)。
　　4 AR組中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率為3.917±0.820，對照組中CD4+CD25+Foxp3+

7、 Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率為6.861±0.616，AR組CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率明顯低于對照組，（t=-13.678，p＜0.01）。說明AR組與對照組中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞表達(dá)水平存在差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5 AR組外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率，與外周血中IL-35的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果

8、示二者間存在正相關(guān)關(guān)系，(r=0.736，p＜0.01)。
　　6 AR組外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞表達(dá)水平占CD4+T細(xì)胞的百分率，與外周血中IL-17的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果示二者間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，(r=-0.630，p＜0.01)。
　　結(jié)論:1 AR患者外周血中IL-35的表達(dá)水平顯著低于對照組，而IL-17的表達(dá)水平顯著高于對照組，提示IL-35分泌減少、IL-17分泌增加與AR的發(fā)病

9、有關(guān)。
　　2 AR患者外周血中IL-35與IL-17的表達(dá)水平呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，IL-35是免疫應(yīng)答中重要的抑制性細(xì)胞因子，AR的發(fā)生可能與IL-35介導(dǎo)的免疫抑制作用減弱進(jìn)而導(dǎo)致Th17細(xì)胞功能亢進(jìn)及IL-17分泌增加有關(guān)。
　　3 AR患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率低于健康對照組，提示AR中Treg細(xì)胞的分化及功能可能受到抑制，這可能是AR發(fā)生的重要機(jī)制。
　　

10、4 AR患者外周血中IL-35的表達(dá)水平與CD4+CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率之間存在正相關(guān)關(guān)系，即在AR患者外周血中IL-35與CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg細(xì)胞的表達(dá)均降低，提示，可能是由于 AR中IL-35數(shù)量的減少，使其促進(jìn)Treg細(xì)胞增殖的能力減弱，導(dǎo)致Treg細(xì)胞的數(shù)量減少及抑制作用減弱;也可能由于IL-35是Treg細(xì)胞發(fā)揮免疫抑制作用的關(guān)鍵性細(xì)胞因子，AR中Treg細(xì)胞因?yàn)槿?/p>

11、乏IL-35，阻礙了Treg細(xì)胞免疫抑制作用的發(fā)揮。二者存在相互作用參與AR的發(fā)生。
　　5 AR患者外周血中IL-17的表達(dá)水平與CD4+CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分率之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，IL-17主要由Th17細(xì)胞分泌產(chǎn)生的細(xì)胞因子，IL-17的分泌增加，間接提示在AR患者外周血中可能存在著Th17細(xì)胞功能的亢進(jìn)，存在Treg/Th17細(xì)胞失衡機(jī)制。
　　6本實(shí)驗(yàn)間接說明了，IL-35是影響