1、南方醫(yī)科大學2012級碩士學位論文神經(jīng)細胞缺血性損傷原蛋白轉化酶1的研究Studyonexpressionofproproteinconvertase1afterneuralcellischemicinjury課題來源：廣東省自然科學基金($2012010009953)學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院粱正羽周東主任醫(yī)師外科學(神經(jīng)外科學)專業(yè)學位碩士廣東省人民醫(yī)院答辯委員會主席柯以銓教授答辯委員會委員白小欣教授李方成教

2、授陸永建教授詹升全主任醫(yī)師2015年5月6日廣州摘要第一章小鼠局灶性腦缺血性損傷后原蛋白轉化酶1及神經(jīng)肽Y表達變化研究目的構建小鼠局灶性腦缺血再灌注模型，研究PCI及神經(jīng)肽Y(neuropeptideY，NPY)在小鼠腦缺血皮質中的表達及變化規(guī)律。方法構建小鼠線栓法大腦中動脈阻塞模型，將小鼠隨機分為：假手術組、缺血再灌注4h組、24h組，用TTC染色方法評估造模成功與否，出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損的小鼠用于后續(xù)實驗。取小鼠腦組織制成冰凍切片，采用

3、免疫熒光方法檢測PCI蛋白表達。提取小鼠缺血側皮質腦組織總RNA、總蛋白，采用實時熒光定量PCR及WesternBlot技術檢測PCI、NPYmRNA及蛋白在缺血再灌注各個時間點的表達量。結果1TTC染色結果顯示，假手術組、缺血再灌注4h組TTC染色未見梗塞灶，缺血再灌注24h梗塞體積約為262％。2免疫組化結果顯示：PCI主要表達于神經(jīng)元胞體及軸突，假手術組PCI陽性細胞數(shù)為226611928％，缺血再灌注4h組為404642928％

4、，缺血再灌注24h組為328811944％，各組間比較差異具有統(tǒng)計學意義(F16707，P=0004，n=3)。與假手術組比較，缺血再灌注4h組、缺血再灌注24h組PCI陽性細胞數(shù)明顯增多(尸0005)。3PCI蛋白表達水平變化假手術組PCI前體proPCI(pro—proproteinconvertase1，proPCI)相對表達量為O112_0010，缺血再灌注4h組為O3560074，缺血再灌注24h組為02280048；各組pr