1、目的: 生殖支原體可以引起尿道炎、宮頸炎，與慢性非細(xì)菌性前列腺炎、不孕不育癥有一定的相關(guān)性，是一種正在危害人類健康的病原菌。生殖支原體通常采用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)或PCR方法進(jìn)行檢測(cè)，由于生殖支原體生長緩慢，用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)一般需要1—3個(gè)月才能出結(jié)果，嚴(yán)重貽誤臨床診治；PCR法作為分子生物學(xué)的一次重大革命性技術(shù)，在生殖支原體的實(shí)驗(yàn)室診斷方面得到了充分應(yīng)用，但PCR技術(shù)要求高，需要相應(yīng)設(shè)備及場地，一般醫(yī)院難以滿足，這就大大限制了生殖支原體

2、檢測(cè)在臨床的廣泛開展，當(dāng)前臨床急需一種能夠方便、快捷的生殖支原體檢測(cè)試劑盒。本課題借助傳統(tǒng)的SP4培養(yǎng)液為基礎(chǔ)，參考文獻(xiàn)并結(jié)合多年支原體研究經(jīng)驗(yàn)，開發(fā)出一種可以快速培養(yǎng)生殖支原體的培養(yǎng)液，從而可以及時(shí)輔助臨床進(jìn)行生殖支原體的檢測(cè)。
　　方法: 借助傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液配方，對(duì)其各組分進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)靈敏度優(yōu)化方案和特異性優(yōu)化方案，結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)，篩選出生殖支原體培養(yǎng)試劑的最佳配方；然后用臨床分離的生殖支原體菌株和特異性標(biāo)準(zhǔn)菌

3、株進(jìn)行靈敏度與特異性的初步驗(yàn)證；最后，以熒光定量PCR試劑盒為對(duì)照，利用優(yōu)化后的培養(yǎng)液對(duì)872例臨床生殖支原體感染疑似患者標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)分析，評(píng)價(jià)該培養(yǎng)液的性能。
　　結(jié)果: 通過動(dòng)物血清、蛋白胨、酵母粉等組分的正交設(shè)計(jì)，優(yōu)化了傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液，再通過添加調(diào)整無機(jī)鹽、維生素、氨基酸等生長因子，使培養(yǎng)液靈敏度達(dá)到最佳；通過添加多種抑菌劑，從而可以有效抑制非生殖支原體微生物，保持培養(yǎng)液的特異性；利用臨床分離的生殖支原體菌株對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)，