季也蒙畢赤酵母GZ1菌株嗜殺因子的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、嗜殺酵母可以產生一類具有抗微生物活性的外毒素,通常把這種外毒素稱為嗜殺因子(Killer toxin),它們通常是一些蛋白質或者糖蛋白。嗜殺酵母分泌的外毒素可以抑制或殺死一些敏感菌株,并且對自身分泌的嗜殺因子具有免疫性。研究發(fā)現(xiàn)從海洋中分離的海洋嗜殺酵母季也蒙畢赤酵母(Pichia guilliermondii)GZ1菌株對引起梭子蟹“乳化病”的病原酵母WCY具有抑制作用。
   本實驗研究了GZ1菌株的嗜殺因子在不同NaCl濃

2、度(0%,3%,6%,8%)、溫度(15,20,25,30℃)、pH(3.0,4.0,4.5,5.0,6.0)值條件下的抑菌效果。該嗜殺因子的最佳作用條件是NaCl濃度0%、pH為4.0,培養(yǎng)溫度為15℃。研究了鹽度、溫度和pH值對海洋嗜殺酵母GZ1菌株發(fā)酵產嗜殺因子的影響,結果表明該菌株在溫度為20℃,培養(yǎng)基中NaCl含量為0%,pH為4.0時產生嗜殺因子的能力最強。
   確定了不同培養(yǎng)條件對該菌株產生的β-1,3-葡聚糖酶

3、活性的影響,分別測定了不同培養(yǎng)時間(1d,2d,3d,4d,5d,6d)、不同反應溫度(10,20,30,40,50,60℃)不同培養(yǎng)溫度(15,20,25,30,35℃)、不同pH(4.0,4.5,5.0,6.0,7.0)、搖瓶裝液量250ml三角瓶中裝液量分別為(20,30,40,50,60ml)、不同接種量(1,2,3,4,5,6%)對發(fā)酵條件的影響以及最佳碳源(葡萄糖,蔗糖,麥芽糖,甘油,乳糖,玉米粉,麥麩糊精,可溶性淀粉)和最

4、佳氮源(硫酸銨,硝酸銨,氯化銨,磷酸氫二銨,尿素,牛肉膏,蛋白胨)的確定。實驗結果表明最佳培養(yǎng)時間為3d、最佳反應溫度是40℃、最佳培養(yǎng)溫度為20℃、最適pH為4.0時酶活最大、250ml三角瓶中的最佳裝液量為30ml、最佳接種量為3%時酶活最大、最佳碳源為葡萄糖、最佳氮源為蛋白胨。
   本實驗通過紫外線-硫酸二乙酯復合誘變篩選出一株抑菌能力較強并且遺傳性狀穩(wěn)定的的菌株,抑菌能力提高了22.7%、經(jīng)過復篩后該誘變菌株的β-1,

5、3-葡聚糖酶酶活提高了17.8%。
   進一步測定了通過紫外線-硫酸二乙酯復合誘變篩選出的抑菌能力較強并且遺傳性狀穩(wěn)定的菌株在發(fā)酵罐中的最佳發(fā)酵條件,研究了轉速(100,150,200,250rpm)、溫度(15,20,25,30,35℃)、不同起始pH(3.0,4.0,5.0,6.0,7.0)值對發(fā)酵條件的影響。實驗結果表明在發(fā)酵罐中的最佳發(fā)酵條件為轉速200rpm、發(fā)酵溫度為20℃、起始pH值為4.0時的β-1,3-葡聚糖

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