1、目的:對民間草藥六葉龍膽（Gentiana hexaphylla Maxim.ex Kusnez.）進(jìn)行化學(xué)成分的分離試驗(yàn)研究，掌握其所含的主要化學(xué)成分;對其生藥學(xué)特征的研究、主要藥效成分龍膽苦苷的含量測定、建立六葉龍膽的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，控制其藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　方法:主要化學(xué)成分提取分離:對六葉龍膽全草（約1.2kg）切碎后，用20倍量的70％乙醇回流提取兩次，每次2小時，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇得到總浸膏，依次用石油醚(60-90℃)、乙酸

2、乙酯、正丁醇等體積進(jìn)行萃取至近無色，得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分浸膏。其中正丁醇部分、乙酸乙酯部分浸膏，分別依次采用硅膠色譜柱層析、凝膠柱色譜層析、開放ODS柱色譜層析、制備液相分離方法進(jìn)行單體化合物分離。
　　主要安全和有效性指標(biāo)測定:依據(jù)2010年版《中國藥典》一部附錄項下相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，采用理化方法對六葉龍膽根、莖、葉等部位進(jìn)行了橫切面觀察研究、薄層色譜法鑒別項研究，進(jìn)行了水分測定法、灰分測定法、浸出物含量測定以及重金

3、屬限量檢查方法進(jìn)行相關(guān)安全性項目的分析研究，采用高相液相色譜法對其主要藥效成分龍膽苦苷進(jìn)行含量測定的品質(zhì)分析研究。
　　結(jié)果:六葉龍膽藥材的乙酸乙酯提取物中分離得到1個化合物，正丁醇提取物中共分離得到9個化合物，通過理化性質(zhì)及光譜數(shù)據(jù)分析(UV、IR、1D-NMR、2D-NMR、MS)鑒定了它們的結(jié)構(gòu):化合物1是龍膽苦苷，化合物2是當(dāng)藥苷，化合物3是當(dāng)藥苦苷，化合物4是Poacynose，化合物5是5，7，3'，4'-四羥基-8-

4、C-β-D-葡萄糖黃銅碳苷，化合物6是三葉草苷，化合物7是vanillyl alcohol-4-O-β-D-glucopyranoside，化合物8是異它喬糖甙，化合物9是1，5-bis(β-D-glucopyranosyloxy-2-(3'，3'-dimethylallyl)benzene，化合物10是6-hydroxy-2-(hydroxymethyl) phenylβ-D-glucopyranoside。其中化合物1、2、3、6是

5、裂環(huán)烯醚萜苷，化合物5是黃酮苷。上述化合物均為首次從該種植物中分離得到。
　　對六葉龍膽生藥學(xué)特征有了初步認(rèn)識，確定了以龍膽苦苷作為對照品，以三氯甲烷:甲醇:水(30:10∶3)下層溶液為展開劑系統(tǒng)的薄層色譜法鑒別方法。六葉龍膽中龍膽苦苷含量不得低于0.8％。確立了檢查項下水分不得過10.0％;總灰分不得過6.0％，酸不溶灰分不得過1.0％;水溶液熱浸法浸出物不得低于25.0％。鉛不得過百萬分之一、鎘不得過千萬分之二、砷不得過千萬