1、目的:脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是十分嚴重的脊柱疾病并發(fā)癥,常會引起損傷節(jié)段以下肢體嚴重的功能障礙，其發(fā)生率呈逐年上升的趨勢，但由于神經元本身再生能力不足，脊髓損傷的治療一直是醫(yī)學界難點。隨著細胞技術的進步，外源性干細胞移植為脊髓損傷的治療提供一種可能有效的方法。骨髓間充質干細胞有較強的自我更新和增殖能力，且來源廣泛、分離培養(yǎng)簡單，有望成為治療脊髓損傷的“種子細胞”。但由于移植后的骨髓間充質干細胞在宿主體內

2、成活率及轉化率較低，其在實驗研究及進一步應用中受到很大的限制。miRNA是一類高度保守的非編碼小RNA分子，在生物體內廣泛存在，對真核生物的基因表達、細胞周期調控和個體發(fā)育等均有影響。有研究發(fā)現miRNAlet-7b有促進干細胞分化，調控神經干細胞的自我修復和更新。但在治療脊髓損傷方面， miRNAlet-7b修飾的骨髓間充質干細胞是否比單純的骨髓間充質干細胞移植修復療效更好，目前尚未有研究報道。本實驗目的是通過免疫組織化學染色法檢測骨

3、髓間充質干細胞移植后大鼠脊髓組織中神經絲蛋白200（neuro filament200，NF-200）和膠質纖維酸性蛋白（gilal fibrillary acidic protein, GFAP）的表達，初步探討miRNAlet-7b修飾骨髓間充質干細胞在大鼠脊髓損傷修復中的作用及其機制。
　　方法：選取SD大鼠60只，采用隨機數字表法分為3組：對照組、BMSCs組、miRNA組，每組20只。3組均采用改良Allen’s法制備T

4、12脊髓損傷模型。造模后1周，對照組僅在損傷部位注射等量的生理鹽水，BMSCs組大鼠移植陰性對照慢病毒載體感染的 BMSCs，miRNA組大鼠移植 miRNA let-7b慢病毒載體感染的BMSCs。分別于移植后3天、1周、2周、4周、8周按Basso Beattie Bresnahan（BBB）標準量表對大鼠后肢運動功能進行評分。采用免疫組織化學染色法檢測并統(tǒng)計脊髓組織中NF200染色陽性細胞數和GFAP染色陽性面積，應用HE染色方法

5、評估損傷段脊髓組織的病理變化。所有數據均用SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析，定量資料用x±s的形式來表示。各組間比較采用單因素方差（ANOVA）分析，如3組方差齊時，采用t（LSD-t）檢驗進行組間的比較，如3組之間方差不齊時，則采用Tamhane’s T2進行檢驗，檢驗水準α=0.05。
　　結果：
　　1、造模后3組大鼠均出現了嚴重的雙下肢功能障礙，此時3組大鼠BBB評分結果比較，差異無統(tǒng)計學意義（F=0.500，P=0.6

6、22）；細胞移植后，3組大鼠 BBB評分均不斷升高，大鼠雙下肢運動功能也有所改善，移植后各時間點大鼠BBB評分比較：miRNA最高、BMSCs組次之、對照組最低，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　2、NF200免疫組化結果顯示：細胞移植后3天，3組大鼠脊髓內NF200陽性細胞數比較，miRNA組略高，但各組間比較無統(tǒng)計學意義（F=1.275，P=0.325）；隨實驗進展，細胞移植后1周、2周、4周、8周NF200染色

7、陽性細胞數均不斷增多，其中miRNA組最多、BMSCs組次之、對照組最少，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）
　　3、GFAP免疫組化結果顯示：對照組GFAP染色陽性面積比較持續(xù)性升高，miRNA組和BMSCs組先升高后降低。3組GFAP染色面積比較：對照組最高、BMSCs組次之，miRNA組最低，3組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　4、HE染色觀察：3組大鼠脊髓組織內均可見組織結構紊亂充血，神經細胞水腫等病

8、理變化，miRNA組和BMSCs組病理學改變較對照組輕。
　　結論：
　　1、骨髓間充質干細胞移植可以提高脊髓損傷大鼠的雙下肢功能， miRNAlet-7b修飾的骨髓間充質干細胞對大鼠脊髓損傷修復效果更好。
　　2、骨髓間充質干細胞在脊髓組織微環(huán)境下能分化為神經元樣細胞， miRNAlet-7b能促進骨髓間充質干細胞向神經元樣細胞的分化；骨髓間充質干細胞移植可以減少星形膠質細胞的GFAP表達量，抑制損傷脊髓組織中膠質瘢